流式细胞术快速计数检测

检测项目

细胞总数计数：对样本中所有细胞的数量进行统计，检测范围1×10³~1×10⁷ cells/mL，精度±5%。

活细胞比率：采用荧光染料（如PI）区分活细胞与死细胞，检测阈值荧光强度≥100AU，结果以活细胞占总细胞的百分比表示。

细胞大小分布：通过前向散射光（FSC）信号测量细胞体积，分辨率≤0.5μm，输出细胞大小分布直方图。

细胞颗粒度：利用侧向散射光（SSC）信号分析细胞内部结构复杂度（如细胞器、颗粒），动态范围10~10000AU。

荧光标记细胞计数：对特定荧光标记的细胞（如CD4+T细胞、肿瘤干细胞）进行计数，检测灵敏度≤1个阳性细胞/1000个细胞。

细胞周期分析：通过DNA染料（如PI）染色，分析细胞处于G0/G1、S、G2/M期的比例，分辨率≤2% CV。

凋亡细胞检测：利用Annexin V/PI双染色识别凋亡早期（Annexin V+PI-）和晚期（Annexin V+PI+）细胞，凋亡细胞比率检测范围0~100%。

细胞增殖分析：通过CFSE或BrdU标记，检测细胞增殖情况，计算增殖指数，精度±3%。

细胞碎片比例：统计样本中细胞碎片的数量占比，碎片定义为FSC信号低于正常细胞1/3，精度±2%。

荧光强度均值：计算特定荧光通道（如FITC、PE）的平均荧光强度（MFI），反映标记物（如抗体、荧光蛋白）的表达水平，变异系数（CV）≤5%。

检测范围

临床血液样本：外周血、骨髓液、脑脊液等，用于白血病细胞计数、免疫细胞亚群（如CD3+、CD4+、CD8+T细胞）分析。

细胞培养物：贴壁细胞（如HEK293、Hela细胞）、悬浮细胞（如Jurkat、THP-1细胞），监测细胞生长状态、纯度及活力。

微生物样本：细菌（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌）、真菌（如酵母菌、白色念珠菌），快速计数微生物数量及活力。

流式抗体质控品：荧光标记抗体（如CD3-PE、CD4-FITC），验证抗体的特异性、荧光强度及稳定性。

干细胞样本：胚胎干细胞、间充质干细胞（如骨髓间充质干细胞、 adipose-derived stem cells），分析干细胞表面标志物（如CD133、CD44、CD90）的表达。

肿瘤细胞系：乳腺癌细胞（如MCF-7、MDA-MB-231）、肺癌细胞（如A549、H1299），检测肿瘤细胞的异质性（如大小、荧光表达）及药物处理后的细胞数量变化。

疫苗制品：病毒样颗粒（VLP）、灭活疫苗（如新冠病毒灭活疫苗），计数疫苗中的有效成分（如病毒颗粒）数量及纯度。

血液制品：血小板、红细胞悬液、血浆制品，检测血液制品中的细胞数量、活力及污染情况（如细菌、碎片）。

环境微生物：水体（如自来水、河水）、土壤中的微生物，快速监测环境中的微生物负荷及种类。

药物筛选样本：药物处理后的细胞群（如化疗药物处理的肿瘤细胞），分析药物对细胞数量、活力及表型（如凋亡、增殖）的影响。

检测标准

ISO 19227:2015 流式细胞术 - 样本制备和分析的一般要求。

GB/T 37865-2019 流式细胞术检测用样本预处理指南。

ASTM F3088-14 流式细胞术用于细胞治疗产品的质量控制标准。

ISO 20391-1:2018 生物技术 - 细胞计数 - 第1部分：流式细胞术方法。

GB/T 40178-2021 流式细胞术 免疫细胞亚群分析通则。

CLSI H42-A2 流式细胞术在临床实验室中的应用指南。

ISO 13073-2:2019 水质 - 微生物学 - 第2部分：流式细胞术计数方法。

GB/T 28630.2-2012 动物源性饲料中动物源性成分检测 第2部分：流式细胞术法。

ASTM E2474-08 流式细胞术用于微生物快速检测的标准方法。

ICH Q6B 生物制品的质量标准 - 流式细胞术检测要求。

检测仪器

流式细胞仪（FACSCanto II型）：具备3激光（488nm、633nm、405nm）8通道检测能力，用于细胞计数、荧光信号（FITC、PE、APC等）采集和分析。

自动样本制备系统（Attune NxT型）：支持批量样本处理（最大12个样本/批），实现样本的稀释、染色、混匀等步骤的自动化，提高样本制备的一致性和效率。

荧光校准微球（RCP-30-5A）：包含5个不同荧光强度的微球，用于校准流式细胞仪的荧光通道（如FITC、PE），确保检测结果的准确性和重复性。

细胞活力分析仪（Vi-Cell XR型）：结合台盼蓝染色和图像分析技术，快速测定细胞活力（活细胞占比）和浓度，检测范围1×10⁴~1×10⁷ cells/mL，精度±5%。

高速离心机（5810R型）：用于样本预处理中的细胞分离（如外周血中淋巴细胞的分离），转速范围100~15000 rpm，离心力可达21952×g，支持温度控制（4~37℃）。

超纯水系统（Synergy UV型）：提供用于样本稀释和试剂配制的超纯水，电阻率≥18.2 MΩ·cm，总有机碳（TOC）≤10 ppb，确保试剂的纯度和检测结果的可靠性。

恒温培养箱（MCO-18AIC型）：用于细胞培养样本的预处理（如细胞复苏、培养），温度控制范围35~39℃，精度±0.1℃，湿度控制范围80~95% RH。

微量移液器（P20/P200/P1000型）：用于样本和试剂的精确移取，移液体积范围2~1000 μL，误差≤1%，确保实验的重复性。

流式细胞术数据处理软件（FlowJo v10）：用于流式细胞术数据的分析和可视化，支持多参数统计（如直方图、散点图、等高线图）、细胞群体分群（如门控分析）和图形输出（如PDF、PNG）。

细胞固定液（4%多聚甲醛）：用于样本的固定，保持细胞的形态和荧光特性（如荧光抗体的结合位点），以便后续检测，固定时间15~30分钟，4℃保存。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。