玉米糁单增李斯特菌检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-08-23  

本文系统阐述玉米糁中单增李斯特菌的微生物检测流程,涵盖核心检测项目、适用材料范围、国际与国家检测标准及关键仪器功能。重点包括定量分析、选择性培养、分子诊断等方法,确保食品安全风险评估的准确性和可靠性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

单增李斯特菌定量检测:测定玉米糁样品中目标细菌的数量。检测参数:检测限1 CFU/25g,定量范围10-10^8 CFU/g,置信区间95%。

选择性富集培养:通过选择性培养基富集单增李斯特菌。检测参数:培养时间24-48小时,温度37°C,培养基成分如FB1肉汤。

平板分离鉴定:在选择性琼脂上分离细菌菌落。检测参数:培养基类型PALCAM琼脂,培养条件30-35°C,菌落大小0.5-1.5mm。

聚合酶链式反应检测:基于DNA扩增识别目标基因。检测参数:目标基因hlyA,检测灵敏度10^2拷贝/μL,循环阈值Ct≤35。

免疫磁珠分离:使用抗体包被磁珠捕获目标细菌。检测参数:回收率≥90%,特异性100%,样品处理时间30分钟。

生化试验:鉴定细菌代谢特性。检测参数:测试项目包括糖发酵试验,反应时间24小时,准确度≥98%。

血清学分型:确定菌株特异性血清型。检测参数:抗血清标准品,分型覆盖1/2a、1/2b等主要型别。

毒素产生检测:评估李斯特菌素活性。检测参数:细胞毒性试验方法,半致死剂量LD50测定范围。

抗生素敏感性测试:分析细菌耐药性谱。检测参数:最小抑菌浓度MIC值,标准抗生素盘选择。

环境监控检测:监测生产区域细菌污染水平。检测参数:空气采样体积100L,表面擦拭检测限10 CFU/cm²。

快速酶联免疫分析:利用抗体-抗原反应定量细菌。检测参数:检测时间2小时,灵敏度1 ng/mL。

分子信标探针检测:基于荧光标记识别目标序列。检测参数:探针长度20-25bp,特异性100%。

脂多糖检测:分析细菌细胞壁成分。检测参数:比色法测量,吸光度范围0.1-2.0 OD。

检测范围

玉米糁成品:玉米粉碎加工后的直接产品,适用于微生物污染评估。

玉米加工设备:包括磨粉机和粉碎机,监控生产环节细菌残留。

食品生产线表面:输送带和工作台,评估设备清洁度。

储存设施:仓库和料仓,检测环境湿度相关微生物滋生。

包装材料:塑料或纸质包装袋,分析接触性污染风险。

水源:加工用水和清洗水,监测水质微生物含量。

空气样品:生产车间空气,收集悬浮颗粒细菌负荷。

土壤样品:玉米种植土壤,溯源潜在污染输入源。

动物饲料:玉米副产品饲料,确保动物源性安全。

零售包装产品:市售玉米糁食品,终端消费安全控制。

食品添加剂:防腐剂和稳定剂,检测辅助物质微生物影响。

运输容器:货车和储藏箱,评估物流过程交叉污染。

实验室器具:培养皿和移液管,保障检测过程无菌性。

检测标准

ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes — Part 1: Detection method.

GB 4789.30-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验。

AOAC Official Method 993.12 Listeria monocytogenes in Dairy Products, Seafoods, and Meats.

FDA Bacteriological Analytical Manual Chapter 10 Detection of Listeria monocytogenes in Foods and Environmental Samples.

EN ISO 16140:2016 Microbiology of the food chain — Method validation.

GB/T 4789.28-2003 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂。

ISO 7218:2007 Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for microbiological examinations.

ASTM F3176-17 JianCe Guide for Detection of Nucleic Acid Sequences Specific to Listeria monocytogenes by PCR.

GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范 食品微生物检测。

ISO 11133:2014 Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media.

检测仪器

实时荧光定量PCR系统:用于扩增和检测单增李斯特菌特异性DNA序列。具体功能:实时监测荧光信号,实现快速定量分析。

高压蒸气灭菌设备:提供高温高压环境灭菌培养基和器具。具体功能:确保样品处理过程无菌条件。

恒温培养箱:维持恒定温度环境培养细菌样品。具体功能:控制温度37°C±1°C,促进细菌生长。

光学显微镜:放大观察细菌形态和结构。具体功能:进行初步菌落鉴定,放大倍数100-1000倍。

高速离心机:分离样品中的细菌细胞和杂质。具体功能:沉淀细菌沉淀物,转速范围1000-10000 rpm。

酶联免疫吸附分析仪:基于抗体-抗原反应检测细菌抗原。具体功能:定量测定李斯特菌素含量。

微生物计数器:自动计数琼脂平板上的菌落形成单位。具体功能:快速统计CFU数量,精度±5%。

磁珠分离系统:利用磁场分离目标细菌。具体功能:高效捕获免疫磁珠结合的细菌。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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