底物特异性检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-09-03  

底物特异性检测是生物化学分析的核心方法,用于精确评估分子间的选择性相互作用。检测要点包括结合亲和力、催化效率、抑制常数等关键参数的量化,确保结果的准确性和可重复性。该方法适用于药物开发、诊断试剂验证和生物过程监控。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

酶活性测定:评估酶催化底物转化的能力,参数包括米氏常数Km和最大速率Vmax。

结合常数测定:量化分子间结合强度,参数包括解离常数Kd和结合速率Kon。

特异性指数计算:衡量底物选择性,参数包括选择性比率和交叉反应性百分比。

抑制常数测定:分析抑制剂对酶活性的影响,参数包括半数抑制浓度IC50和抑制类型。

底物饱和曲线:绘制底物浓度与反应速率关系,参数包括饱和点和线性范围。

时间进程分析:监测反应随时间的变化,参数包括初始速率和稳态时间。

pH依赖性测试:评估pH对反应的影响,参数包括最适pH和pH稳定性范围。

温度依赖性测试:测定温度对活性的作用,参数包括最适温度和热变性点。

竞争性结合 assay:区分竞争性与非竞争性结合,参数包括抑制曲线和位移值。

非竞争性抑制 assay:分析不可逆抑制机制,参数包括残余活性和抑制效率。

检测范围

药物候选化合物:筛选高特异性先导分子。

生物治疗抗体:评估靶标结合特异性和亲和力。

酶制剂产品:验证催化底物选择性和活性。

诊断试剂盒:检测生物标志物识别准确性。

食品添加剂:分析成分相互作用和安全性。

环境污染物:监测特异性降解或吸附行为。

化妆品成分:评估皮肤渗透性和反应特异性。

农业生物制剂:测试害虫或病原体靶向性。

科研用重组蛋白:表征结合域和功能特异性。

工业生物催化剂:优化底物利用效率和选择性。

检测标准

ASTM E1081-12:酶活性测定标准方法。

ISO 10993-5:生物材料相互作用测试指南。

GB/T 16886-1:医疗器械生物学评价基础标准。

ASTM F1984-99:结合常数测量规范。

ISO 15194:体外诊断试剂性能验证要求。

GB/T 33252-2016:生物制品特异性检测通则。

ASTM E2551-13:抑制常数测定程序。

ISO 17025:检测实验室能力通用要求。

GB/T 34824-2017:酶促反应参数计算指南。

ASTM E2691-16:底物特异性评估标准。

检测仪器

紫外-可见分光光度计:测量吸光度变化,用于监测酶促反应动力学。

荧光光谱仪:检测荧光信号,适用于高灵敏度结合 assay。

高效液相色谱仪:分离和定量底物及产物,用于特异性分析。

等温滴定 calorimeter:直接测量结合热,量化亲和力和 stoichiometry。

表面等离子共振仪:实时监测分子相互作用,提供动力学参数。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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