氨基酸序列分析

检测项目

氨基酸组成分析：测定蛋白质或多肽中20种标准氨基酸的摩尔百分比或绝对含量，是序列分析的基本参数。

N-末端序列测定：确定蛋白质或多肽链起始端的氨基酸排列顺序，常用于蛋白质鉴定和验证。

C-末端序列测定：确定蛋白质或多肽链羧基末端的氨基酸顺序，对完整序列确认至关重要。

全长序列测定：通过质谱或Edman降解等方法，获取蛋白质完整的氨基酸排列顺序。

分子量测定：精确测量蛋白质或多肽的分子量，与理论值对比以验证序列正确性或发现修饰。

二硫键定位：确定半胱氨酸残基之间形成的二硫键的具体连接位置，关乎蛋白质高级结构。

序列同源性比对：将目标序列与数据库中的已知序列进行比对，寻找进化相关性和功能线索。

翻译后修饰鉴定：检测并定位磷酸化、糖基化、甲基化等发生在蛋白质合成后的化学修饰。

等电点预测：基于氨基酸序列中可电离基团的组成，计算蛋白质的理论等电点。

疏水性分析：评估序列中不同区域的疏水特性，用于预测跨膜区、信号肽和蛋白质折叠。

检测范围

重组蛋白药物：对基因工程表达的治疗性蛋白质进行全面的序列确证和质量控制。

抗体与融合蛋白：分析单克隆抗体、双特异性抗体及Fc融合蛋白的轻重链序列和互补决定区。

多肽合成产物：对化学合成的多肽药物、抗原肽等进行序列验证和纯度评估。

酶与功能性蛋白：解析各类酶、细胞因子、激素等生物活性蛋白的序列特征与活性中心。

血浆/血清蛋白：从复杂生物体液中鉴定和定量分析特定的蛋白质标志物。

细胞裂解液蛋白：对全细胞或组织裂解物中的目标蛋白进行鉴定和序列分析。

膜蛋白提取物：针对难溶的跨膜蛋白，进行特殊处理后的序列片段分析。

古生物或考古样本：对极其微量、部分降解的古老蛋白质残留物进行序列测定。

食品中的过敏原蛋白：检测食品基质中微量的致敏蛋白成分并进行序列确认。

工业用酶制剂：对洗涤剂、纺织等行业使用的酶产品进行序列一致性和稳定性监控。

检测方法

Edman降解法：经典的N-端测序方法，通过循环化学反应逐一降解并鉴定氨基酸。

液相色谱-质谱联用：将蛋白质酶解后，利用LC分离肽段，再由高分辨率质谱进行序列解析。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱：常用于肽质量指纹图谱分析和分子量精确测定。

串联质谱法：通过碰撞诱导解离等技术产生肽段碎片离子，从而推导出氨基酸序列。

氨基酸分析法：将蛋白质完全酸水解后，使用离子交换色谱或衍生化方法分析氨基酸组成。

圆二色谱法：通过测量蛋白质的圆二色性，间接分析序列所决定的二级结构含量。

核磁共振波谱法：用于溶液中蛋白质的结构解析，可获取原子水平的序列和构象信息。

生物信息学数据库搜索：将质谱数据与理论数据库进行比对，实现快速、高通量的序列鉴定。

从头测序算法：不依赖数据库，直接从质谱碎片图谱中推导出全新的氨基酸序列。

毛细管电泳法：基于肽段或氨基酸在电场中的迁移率差异进行分离和间接序列分析。

检测仪器设备

蛋白质测序仪：专门用于执行Edman降解化学反应的自动化仪器，进行N-端序列分析。

高效液相色谱仪：用于分离蛋白质酶解后的复杂肽段混合物，为下游质谱分析做准备。

高分辨率质谱仪：如Q-TOF、Orbitrap等，提供精确质量数，用于肽段和蛋白质的鉴定与测序。

三重四极杆质谱仪：常用于目标蛋白质的定量分析和特定修饰位点的验证。

MALDI-TOF质谱仪：适用于肽质量指纹图谱分析和高通量的分子量筛查。

氨基酸分析仪：集成水解、衍生、分离和检测模块，专门用于氨基酸组成定量分析。

圆二色谱仪：测量蛋白质在远紫外区的圆二色光谱，用于快速评估二级结构。

核磁共振波谱仪：高场强的NMR设备可用于测定蛋白质在溶液中的三维结构和动态信息。

毛细管电泳系统：用于基于电荷和大小分离肽段或氨基酸，具有高分离效率。

生物信息学服务器与软件：运行数据库搜索、序列比对、结构预测等算法的计算平台和专业软件。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。