多肽序列质谱试验

检测项目

分子量测定：精确测定多肽样品的分子量，是验证合成纯度或鉴定未知多肽的首要步骤。

序列确证：通过质谱碎片信息，验证合成多肽的氨基酸排列顺序是否与设计序列一致。

纯度分析：评估样品中目标多肽的含量，检测是否存在缺失序列、截短肽或相关杂质。

修饰位点鉴定：识别并定位多肽上的翻译后修饰，如磷酸化、糖基化、乙酰化等。

二硫键定位：确定多肽链内或链间二硫键的连接位置，对理解其高级结构至关重要。

N端/C端测序：通过阶梯式降解或碎片分析，确定多肽的N末端和C末端氨基酸序列。

杂质鉴定：对样品中的主要杂质进行质谱分析，鉴定其化学结构，辅助工艺优化。

同位素分布分析：观察质谱图中的同位素峰型，辅助确认分子式并评估样品纯度。

电荷态分布分析：在电喷雾质谱中分析多肽离子所带电荷数的分布，辅助判断样品均一性。

定量分析：采用标记或非标记策略，对不同样品中的特定多肽进行相对或绝对定量。

检测范围

合成多肽：适用于化学合成或重组表达的多肽，用于质量控制和结构验证。

酶解肽段：蛋白质经过蛋白酶（如胰蛋白酶）消化后产生的肽段混合物。

翻译后修饰肽段：携带磷酸化、糖基化、甲基化等修饰的肽段，是功能蛋白质组学的重点。

环状多肽：具有首尾相连或其他环化结构的多肽，需特殊碎裂方式解析。

含有非天然氨基酸的多肽：包含D型氨基酸、特殊标记氨基酸等修饰的肽链。

二硫键连接的多肽：分子内或分子间通过二硫键交联形成的复杂多肽结构。

多肽药物及其代谢物：对多肽类药物进行体内外代谢产物的鉴定与分析。

多肽-配体复合物：研究多肽与小分子、金属离子等配体非共价结合的复合物。

复杂生物样品中的多肽：从血清、组织裂解液等复杂基质中提取的目标多肽。

高分子量多肽/小蛋白：分子量在几千到两万道尔顿之间的多肽或小蛋白质。

检测方法

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱：利用基质辅助激光解吸电离，结合飞行时间分析器，擅长测定完整多肽分子量。

电喷雾电离串联质谱：通过电喷雾产生多电荷离子，结合串联质谱进行序列解析和修饰鉴定。

碰撞诱导解离：最常见的串联质谱碎裂技术，通过惰性气体碰撞产生b/y系列离子，用于序列测定。

电子转移解离/电子捕获解离：产生c/z系列离子的软碎裂技术，特别适用于保留不稳定的翻译后修饰信息。

高能碰撞解离：提供更丰富的碎片信息，尤其有利于糖肽等复杂修饰的分析。

液相色谱-质谱联用：将液相色谱的分离能力与质谱的鉴定能力结合，用于复杂多肽混合物的分析。

自上而下测序：直接对完整蛋白质或多肽进行碎裂和测序，保留完整的修饰信息。

自下而上测序：将蛋白质酶解成肽段后进行质谱分析，是蛋白质组学的标准策略。

多反应监测/平行反应监测：基于三重四极杆或高分辨质谱的高灵敏度、高特异性靶向定量方法。

数据依赖采集/数据非依赖采集：两种不同的质谱数据采集模式，分别用于靶向发现和非靶向全景分析。

检测仪器设备

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：核心设备，配备MALDI离子源和TOF质量分析器，用于快速分子量测定和指纹图谱分析。

三重四极杆质谱仪：由Q1、Q2、Q3三个四极杆组成，擅长高灵敏度的靶向定量和多反应监测分析。

四极杆-飞行时间串联质谱仪：结合四极杆的离子选择能力和TOF的高分辨率、高质量精度，是序列分析和鉴定的利器。

轨道阱系列高分辨质谱仪：基于静电场轨道阱技术，提供极高的质量精度和分辨率，适合复杂样品深度分析。

傅里叶变换离子回旋共振质谱仪：目前分辨率和质量精度最高的质谱仪，用于最精确的分子量测定和复杂结构解析。

高效液相色谱仪：与质谱联用的核心分离设备，用于在质谱分析前对多肽混合物进行分离纯化。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。