代谢稳定性实验

检测项目

肝微粒体温孵实验：将化合物与肝微粒体（含CYP450酶等）共孵育，评估其在肝脏代谢酶作用下的稳定性。

肝细胞温孵实验：使用新鲜或冻存的肝细胞进行温孵，更真实地模拟体内肝脏的代谢环境。

血浆稳定性实验：考察化合物在血浆中受酯酶、蛋白酶等作用下的化学稳定性。

全血稳定性实验：评估化合物在全血环境中受血细胞及血浆成分共同作用下的稳定性。

S9组分温孵实验：使用肝组织S9组分（含胞质和微粒体酶）进行代谢稳定性及Ⅱ相代谢反应评估。

CYP450酶表型研究：鉴定负责化合物代谢的主要CYP450酶亚型（如CYP3A4, 2D6等）。

代谢半衰期（t1/2）测定：计算化合物在孵育体系中浓度减少一半所需的时间，量化代谢速率。

代谢产物鉴定：利用高分辨质谱等技术，分析并鉴定化合物经代谢后生成的主要产物结构。

种属差异比较：平行比较化合物在不同种属（人、大鼠、犬等）肝微粒体或肝细胞中的代谢差异。

检测范围

新化学实体（NCEs）：药物发现阶段的全新小分子化合物，评估其代谢特性。

前药：评估前药在靶向部位转化为活性药物的代谢速率和途径。

生物制剂：如多肽、寡核苷酸等，评估其在生物基质中的酶解稳定性。

天然产物提取物：研究其有效成分在体内的代谢命运。

候选药物：在临床前开发阶段，对1-2个优选候选化合物进行系统的代谢稳定性评价。

手性药物：分别评估其对映异构体在代谢上的可能差异。

药物代谢物：对已鉴定的代谢产物进行进一步的稳定性研究。

中药复方：研究复杂体系中多成分的代谢相互作用及稳定性。

农药与化学品：评估其在环境生物或哺乳动物体内的代谢降解行为。

化妆品功效成分：评估其经皮吸收后可能的皮肤代谢稳定性。

检测方法

液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）：高灵敏度、高选择性的主流方法，用于定量分析原型药物及代谢物。

高效液相色谱法（HPLC-UV/DAD）：使用紫外或二极管阵列检测器，适用于浓度较高或具有特定发色团的化合物。

放射性标记示踪法：使用14C或3H标记的化合物，可全面追踪代谢产物并进行质量平衡研究。

荧光检测法：针对自身具有荧光或可衍生化为荧光产物的化合物进行检测。

酶活性抑制法：通过检测特定代谢酶活性变化，间接评估其与化合物的相互作用。

高通量筛选（HTS）：采用自动化平台和快速检测技术，对化合物库进行代谢稳定性的初步筛选。

多肽图谱与序列分析：专门用于蛋白质、多肽类药物的代谢降解分析。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）：适用于挥发性或可衍生化为挥发性代谢产物的分析。

核磁共振波谱法（NMR）：用于代谢产物的结构确证，提供详细的原子连接信息。

毛细管电泳法（CE）：适用于手性药物代谢研究及生物大分子代谢分析。

检测仪器设备

三重四极杆质谱仪（LC-MS/MS）：进行定量生物分析的核心设备，具有极高的灵敏度和特异性。

高分辨质谱仪（HRMS）：如Q-TOF或Orbitrap，用于精确质量测定和代谢产物鉴定。

高效液相色谱仪（HPLC）：配备自动进样器、柱温箱和多种检测器，用于样品分离。

恒温振荡培养箱：提供稳定温度（通常37℃）和振荡条件，用于体外温孵实验。

超高效液相色谱仪（UPLC）：提供更高分离速度和分辨率，常与质谱联用。

生物安全柜：在处理原代肝细胞等生物材料时，提供无菌操作环境。

液体处理工作站：实现温孵实验中的加样、混合、取样等步骤的自动化，提高通量和重现性。

低温高速离心机：用于温孵后样本的快速终止反应及蛋白沉淀等预处理。

氮吹浓缩仪：用于生物样品在分析前的浓缩步骤，以提高检测灵敏度。

细胞培养系统：用于原代肝细胞的培养、维持或肝细胞系细胞的培养。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。