鼻病毒核酸检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

鼻病毒核酸检测是诊断鼻病毒感染的核心方法,基于分子生物学技术如逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒RNA。专业要点包括样本采集规范、核酸提取纯度控制、特异性引物设计及检测灵敏度验证,确保结果准确可靠,适用于临床诊断和流行病学研究。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

鼻病毒RNA定性检测:确认样本中病毒RNA存在,灵敏度95%,特异性98%,使用保守区域特异性引物。

鼻病毒定量检测:测量病毒载量,范围10^2至10^8拷贝/mL,误差率低于5%,适用于疾病进展监测。

变异株分型分析:识别HRV-A、HRV-B和HRV-C亚型,分辨率达单核苷酸多态性水平,覆盖率99.9%。

交叉反应性评估:测试与其他呼吸道病毒如腺病毒交叉,假阳性率控制低于1%,确保特异性。

样本质量控制DNA/RNA完整性检测:评估提取核酸质量,260/280吸光度比值1.8-2.0,片段大小分析。

内参基因检测:人类RNase P基因定量,变异系数CV<5%,用于样本均一性校正。

检测限(LOD)测定:确定最低可检测浓度,设定为10拷贝/反应,重复测试10次验证。

密度测试:日内重复性CV<3%,日间CV<5%,确保结果稳定性。

准确性验证:与金标准方法比较,偏差率低于±10%,使用临床样本库评估。

扩增效率评估:PCR效率90%-110%,斜率-3.3至-3.5,优化反应条件。

引物探针特异性验证:通过BLAST比对,无脱靶结合,退火温度55-60°C。

稳定性测试:样本在-70°C存储下检测性能变化,降解率<10%/年。

检测范围

鼻腔拭子样本:临床诊断主要类型,含上呼吸道细胞,需低温运输保存。

咽拭子样本:用于综合呼吸道感染诊断,采集后立即处理以防降解。

痰液样本:含粘液和细胞碎片,需液化处理,适用下呼吸道感染分析。

支气管肺泡灌洗液(BAL):重症患者样本,细胞浓度高,检测灵敏度调整。

环境表面擦拭样本:医院和公共场所监测,评估污染物残留风险。

空气采样过滤器:捕获气溶胶颗粒,定量空气传播病毒载量。

疫苗研发原料:评估候选疫苗免疫原性,包含病毒灭活材料。

抗病毒药物筛选材料:测试化合物抑制效果,使用细胞培养模型。

流行病学调查研究样本:大规模人群筛查,支持疫情追踪。

儿童呼吸道样本:高发群体监测,需专用采样工具。

免疫缺陷患者样本:高风险诊断,强调快速周转时间。

动物模型样本:疫苗和药物研究,如小鼠肺部组织。

检测标准

ISO 15189:2012 医学实验室质量和能力要求,规范核酸诊断流程。

GB/T 34796-2017 核酸定量检测方法通则,覆盖RT-PCR技术参数。

ASTM E1873-2017 分子诊断检测标准指南,定义灵敏度验证协议。

WHO 核酸扩增检测试剂评价指南,强调变异株识别准确度。

GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求,确保样本处理安全。

ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力要求,适用于认证体系。

CLSI MM19-A2 分子诊断质量控制标准,优化样本提取效率。

GB/T 37871-2019 生物样本库管理规范,涉及储存和运输。

检测仪器

实时荧光定量PCR系统:用于RNA扩增和实时检测,支持多通道荧光,检测限100拷贝/mL。

自动化核酸提取仪:提取样本RNA,纯化效率>95%,减少人工误差。

高速离心机:分离细胞碎片,转速可达15000rpm,处理多样本类型。

精密微量加样器:精确加样试剂,精度±0.5μL,确保反应一致性。

生物安全柜:提供无菌操作环境,符合生物安全二级标准。

恒温金属浴:预热试剂和样本,温度范围4-100°C,稳定性±0.5°C。

紫外分光光度计:测量核酸浓度,波长260nm,准确度±2%。

凝胶电泳装置:分析扩增产物,分辨率达100bp,验证特异性。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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