定量靶向蛋白质组学检测

检测项目

绝对定量分析：采用稳定同位素标记肽段作为内标，定量精度误差≤15%，线性范围跨4个数量级。

翻译后修饰检测：磷酸化位点定量检测限0.1 fmol/μg，乙酰化位点覆盖率≥95%。

多肽稳定性验证：加速降解实验中保留时间偏移控制在±0.3min内。

生物标志物验证：同时检测100+目标蛋白，CV值<10%，满足CLIA认证要求。

药物靶点占有率：抗体药物结合位点定量，动态范围1-1000 ng/mL。

细胞通路蛋白监测：Wnt/Notch通路关键因子同步定量，最低检出浓度0.5 amol/μL。

血浆蛋白组分析：高丰度蛋白去除效率>99%，低丰度蛋白回收率≥85%。

膜蛋白定量：去垢剂兼容性质谱体系，跨膜结构域肽段捕获率>90%。

二硫键定位：还原/非还原对比分析，定位精度达单个氨基酸残基。

蛋白复合物定量：Co-IP产物中互作蛋白定量，背景干扰抑制率>98%。

糖基化位点分析：糖链结构鉴定结合糖肽定量，PNGaseF酶解效率≥99%。

检测范围

临床血清样本：肝癌标志物AFP/PIVKA-II联检，样本量需求≤50μL。

细胞裂解液：激酶抑制剂处理组蛋白表达谱，适用HEK293/HeLa等细胞系。

组织切片：FFPE样本蛋白质回收，切片厚度4μm时蛋白得率>80%。

重组蛋白药物：单抗药物CDR区确证，宿主蛋白残留检测限0.01%。

脑脊液检测：神经退行性疾病标志物定量，动态范围覆盖0.1-100 ng/mL。

植物蛋白组：作物胁迫响应蛋白监测，适用水稻/玉米叶片组织。

微生物分泌蛋白：细菌毒力因子时序表达分析，培养上清液直接进样。

外泌体蛋白：超速离心富集样本，标志蛋白Alix/TSG101定量。

食品基质：乳制品过敏原检测，β-乳球蛋白定量限0.1 ppm。

法医样本：毛发角蛋白分型，降解样本中蛋白标志物稳定性>72h。

检测标准

ISO 20914:2019医学实验室-质谱定量分析不确定度评定规范

GB/T 37864-2019生物样品中蛋白质定量检测方法通则

CLSI C62-A液相色谱-串联质谱临床检测指南

ICH Q2(R1)药品分析方法验证技术要求

ISO 23118:2020蛋白质组学数据报告规范

GB/T 40154-2021生物标志物检测试剂盒性能评价方法

FDA Bioanalytical Method Validation Guidance

ISO 21360:2019生物技术-分析方法验证通则

EP17-A2临床实验室检测限建立与验证

GB/T 38725-2020蛋白质组学样本制备规范

检测仪器

三重四极杆质谱仪：配备电喷雾离子源，执行MRM扫描速度500 Da/s，驻留时间≥10 ms。

超高效液相色谱：2.1×100mm C18色谱柱，耐受压力1500 bar，梯度延迟体积<100μL。

毛细管电泳系统：实现pI 3-11蛋白质分离，分辨率0.01 pH单位。

超声破碎仪：细胞裂解能量输出30W，占空比50%，保证膜蛋白完整性。

自动化样品处理器：96孔板平行处理能力，移液精度CV<0.5%，降低人为误差。

高分辨质谱仪：轨道阱质量分析器，分辨率240,000@m/z 200，质量精度<1 ppm。

激光显微切割系统：组织特定区域捕获精度达5μm，兼容冷冻切片。

蛋白定量工作站：兼容Bradford/Lowry/BCA法，检测范围0.1-2000 μg/mL。

磁珠富集平台：磷酸化肽段富集效率>90%，非特异性结合率<5%。

芯片纳喷离子源：低流速下（300nL/min）离子化效率提升40%，减少样本消耗。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。