nk细胞活性实验检测

检测项目

细胞裂解活性检测：通过LDH释放法或荧光标记法测定效靶细胞裂解率，效靶比梯度设定为5:1~50:1，报告特异性杀伤率（±2%精度）

IFN-γ分泌能力：采用ELISPOT法检测单位时间内分泌细胞数，灵敏度5个斑点/10⁴细胞

CD107a脱颗粒水平：流式细胞术检测溶酶体相关膜蛋白表达，阈值设定MFI≥10³

穿孔素/颗粒酶表达量：胞内染色法测定细胞毒性颗粒蛋白，检出限0.1pg/cell

NKG2D活化受体密度：定量分析受体分子/细胞数，分辨率≥2000分子/细胞

KIR受体分型：高通量测序法鉴定杀伤细胞免疫球蛋白样受体亚型，覆盖16个基因位点

ADCC效应强度：IgG1抗体介导的靶细胞清除率检测，动态范围10%~95%

细胞增殖动力学：CFSE标记法追踪分裂代数，分辨率达8代

凋亡诱导能力：Annexin V/PI双染法定量靶细胞凋亡率，精度±1.5%

细胞迁移指数：Transwell法测定趋化因子响应迁移率，孔径5μm±0.2μm

线粒体膜电位：JC-1荧光探针法评估细胞能量状态，红绿荧光比精度0.05

ROS产生水平：DCFH-DA探针检测活性氧强度，灵敏度10nM H₂O₂当量

检测范围

免疫治疗药物：CAR-NK细胞制剂、NK细胞增强剂的体外效力验证

肿瘤组织样本：实体瘤/血液瘤浸润性NK细胞功能分析（≥10⁶个细胞样本）

造血干细胞产品：脐带血/骨髓来源NK前体细胞活性评估

生物反应器培养：细胞治疗制品生产过程中的活性监控

免疫调节剂：IL-2/IL-15/PD-1抑制剂的功能验证

医疗器械材料：植入物表面生物相容性对NK活性的影响

感染性疾病模型：HBV/HIV感染中NK细胞应答能力检测

自身免疫疾病：类风湿关节炎患者外周血NK细胞功能分析

围产期免疫：孕妇及新生儿NK活性动态监测

衰老研究：不同年龄段供体NK活性衰减曲线构建

辐射生物学：电离辐射对NK细胞毒性的剂量效应研究

药用辅料：细胞冻存液/DMSO对活性恢复率的影响

检测标准

ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价 - 体外细胞毒性试验

GB/T 39730-2020 细胞计数通用要求

CLSI H42-A2 流式细胞术免疫表型分析指南

Chimerigen标准NK活性检测方案（效靶比25:1，孵育4h）

FDA Guidance for Industry: Potency Tests for Cellular and Gene Therapy Products

EP 2.7.18 欧洲药典细胞毒性检测规范

GB/T 38502-2020 消毒剂实验室杀菌效果检验方法

ISO 21427-1 体外遗传毒性试验标准

GB/T 16886.12-2017 医疗器械生物学评价第12部分：样品制备与参照材料

检测仪器

流式细胞仪：配置405/488/640nm三激光系统，检测NK细胞表面标志物（CD56/CD16）及胞内因子，采集速率≥30000事件/秒

微孔板酶标仪：具备562nm/650nm双波长检测能力，LDH释放法测量精度0.01OD

全自动细胞计数仪：台盼蓝拒染法分析细胞活性，计数精度±2%，符合YY/T 0993-2015标准

激光共聚焦显微镜：60倍油镜观察免疫突触形成，Z轴分辨率0.35μm

高通量电转染系统：NK细胞基因编辑转染效率≥70%，脉冲参数1500V/20ms

程序降温仪：控制冻存降温速率1℃/min，活性复苏率≥85%

微生理分析仪：实时检测阻抗变化评估细胞杀伤动力学，时间分辨率5s

气相液氮储存系统：-196℃气相储存，温度波动±3℃

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。