体细胞基因编辑检测

检测项目

编辑效率检测：测量目标基因位点的编辑频率，参数包括编辑百分比（≥95%）和切割效率（使用qPCR或NGS方法）。

脱靶效应分析：检测非目标位点的编辑事件，参数如全基因组测序深度（≥30x）和脱靶位点数量（≤5）。

细胞活力测定：评估编辑后细胞存活率，参数包括MTT法OD值（相对活力≥80%）和凋亡率（≤10%）。

基因表达分析：监测编辑基因的表达水平，参数如RNA-seq FPKM值（差异倍数≤2）和qPCR Ct值（ΔΔCt≤1）。

插入缺失检测：识别插入或缺失突变，参数如indel频率（≤1%）和突变类型分布。

拷贝数变异检测：分析基因拷贝数变化，参数如CNV比值（0.8-1.2）和qPCR标准曲线R²≥0.99。

功能验证测试：验证编辑细胞的功能，参数如细胞迁移率（正常范围）和分化能力（特定标记表达）。

纯度检测：确保样本无污染，参数如内毒素水平（<0.5 EU/mL）和支原体检测（阴性）。

稳定性测试：评估编辑的长期稳定性，参数如传代次数（10代后编辑保持率≥90%）和冷冻复苏活力。

生物安全评估：检查潜在风险，参数如病毒载量（<1 IU/mL）和致癌基因表达。

序列确认：通过测序确认编辑序列，参数如Sanger测序一致性（100%）和编辑位点覆盖率。

表型分析：观察细胞表型变化，参数如形态学评分和细胞周期分析。

检测范围

基因编辑干细胞：用于再生医学研究和治疗，如诱导多能干细胞编辑。

CAR-T细胞产品：免疫治疗中的编辑T细胞，用于癌症治疗。

转基因动物体细胞：用于疾病模型构建，如小鼠或大鼠细胞。

植物体细胞编辑：农业生物技术应用，如作物抗病性改良。

微生物编辑菌株：工业发酵和生物生产，如酵母或细菌细胞。

临床细胞治疗样本：患者特异性编辑细胞，用于个性化医疗。

生物制药细胞系：重组蛋白生产细胞，如抗体表达系统。

诊断用编辑细胞：高通量检测平台，用于疾病筛查。

研究用细胞培养物：实验室基因编辑实验，如细胞系研究。

组织工程材料：编辑细胞用于植入物，如皮肤或骨组织修复。

食品安全相关细胞：编辑食品微生物检测，如益生菌质量控制。

环境修复细胞：生物降解应用，如污染物处理工程。

检测标准

ISO 20387:2018 生物样本库通用要求。

ASTM E3135-18 基因编辑技术评估标准。

GB/T 37869-2019 基因编辑检测方法规范。

ISO 13485:2016 医疗器械质量管理体系。

GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求。

FDA Guidance for Industry: Testing of Gene Therapy Products。

EMA Guideline on Quality of Advanced Therapy Medicinal Products。

ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力的一般要求。

GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范。

ICH Q5D 细胞基产品的质量要求。

检测仪器

高通量测序仪：用于全基因组测序，检测编辑位点和脱靶效应。

流式细胞仪：分析细胞表面标记、活力和细胞周期。

实时定量PCR仪：测量基因表达水平和拷贝数变异。

荧光显微镜：观察细胞形态和编辑效果可视化。

生物分析仪：评估核酸样本的质量和完整性。

细胞计数仪：测定细胞浓度和活力。

电穿孔系统：用于细胞转染效率测试。

酶标仪：检测细胞活力试剂和生物标志物。

离心机：细胞分离和样本处理。

恒温培养箱：维持细胞培养条件。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。