磷酸化检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-12  

磷酸化检测针对蛋白质磷酸化位点的定量与定性分析,强调检测灵敏度、特异性及重复性。核心要点包括磷酸基团识别、修饰位点定位和定量精度控制,确保数据可靠性用于细胞信号转导研究和药物靶点验证。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

磷酸化位点定位:通过质谱解析磷酸化修饰位置,参数包括分辨率为0.1Da和误差范围±0.01Da。

磷酸化蛋白定量:测量磷酸化蛋白浓度,参数涵盖检测限为0.1ng/mL和线性范围1-1000ng/mL。

激酶活性测定:评估酶催化磷酸化效率,参数包含反应速率单位为kcat/s和IC50值测定精度±5%。

磷酸化抗体特异性检测:验证抗体结合专一性,参数包括交叉反应率低于1%和信噪比大于10:1。

磷酸化肽段富集:分离磷酸化肽段,参数涉及富集效率达90%以上和回收率误差±2%。

磷酸化状态动力学分析:追踪磷酸化动态变化,参数包括时间分辨率0.1秒和衰减常数计算精度±3%。

磷酸化位点突变验证:检测人工突变影响,参数涵盖突变效率评估和磷酸化水平变化量程±50%。

细胞磷酸化信号图谱:绘制细胞内磷酸化网络,参数包括信号强度量化单位和空间分辨率1μm。

磷酸化抑制剂效价测试:测定抑制剂效能,参数涉及抑制率计算和EC50值精度±0.1nM。

磷酸化修饰稳定性评估:检验修饰抗降解能力,参数包含半衰期测量和温度稳定性范围20-40°C。

磷酸化蛋白相互作用分析:研究结合亲和力,参数包括结合常数Kd测定和亲和力变化灵敏度0.1nM。

磷酸化位点保守性比较:比对物种间保守序列,参数涉及序列同源性评分和保守位点识别阈值80%。

检测范围

细胞裂解物样本:提取自培养细胞的蛋白质混合物。

组织匀浆液:来源于动物或人体组织的蛋白提取物。

纯化重组蛋白:基因工程表达的单一磷酸化蛋白。

血清血浆样本:临床采集的体液用于磷酸化生物标志物分析。

药物筛选化合物库:小分子化合物集合用于激酶抑制剂测试。

病理切片组织:固定组织切片用于原位磷酸化检测。

病毒蛋白样本:病毒表达的磷酸化蛋白用于感染机制研究。

植物提取物:从植物组织中分离的磷酸化组分。

细菌培养上清:微生物分泌的磷酸化蛋白产物。

合成肽段库:人工合成的磷酸化肽段序列阵列。

临床诊断样本:患者样本用于疾病相关磷酸化检测。

环境生物样本:水体或土壤中微生物磷酸化蛋白分析。

检测标准

依据ISO20688规范进行磷酸化蛋白定量分析。

ASTME2520标准用于激酶活性测定方法验证。

GB/T34438指南规定磷酸化抗体特异性测试程序。

ISO15197规范涵盖临床样本磷酸化检测质量控制。

GB/T27417标准用于磷酸化肽段富集效率评估。

ASTMF2148指南涉及磷酸化状态动力学研究方法。

ISO17025要求磷酸化检测实验室能力通用准则。

GB/T27025标准确保磷酸化分析数据可追溯性。

ASTME2935规范用于磷酸化抑制剂效价测试流程。

ISO10993-18指南涉及医疗器械相关磷酸化残留检测。

检测仪器

质谱分析系统:用于高分辨率磷酸化位点定位,功能包括肽段测序和修饰质量偏移计算。

凝胶电泳装置:分离磷酸化蛋白,功能涉及分子量区分和印迹转移用于后续检测。

荧光显微镜系统:可视化细胞内磷酸化信号,功能包括实时成像和荧光强度量化分析。

分光光度计:测量磷酸化反应吸光度,功能涵盖动力学曲线记录和酶活性参数计算。

色谱分离单元:纯化磷酸化组分,功能涉及液相分离和洗脱峰积分用于定量。

微孔板读数仪:高通量磷酸化检测,功能包括多孔板信号采集和OD值换算。

离心浓缩设备:富集低丰度磷酸化样本,功能涉及样品浓缩和杂质去除。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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