耐热大肠菌群测定检测

检测项目

样品前处理：采用无菌均质与梯度稀释法，稀释比例1:10~1:10000，确保微生物分散均匀。

初发酵试验：使用月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，44.5℃±0.2℃培养48±2小时，观察产气现象。

复发酵验证：阳性样本转接EC肉汤，44.5℃±0.2℃培养24±2小时，确认产气特性。

耐热大肠菌群计数：记录EC肉汤产气管数，按MPN法计算浓度，单位CFU/100mL。

革兰氏染色鉴定：镜检呈红色阴性杆菌，长度2~3μm，直径0.4~0.7μm。

吲哚试验：阳性菌株在Kovac试剂作用下呈玫瑰红色，反应时间≤30秒。

甲基红测试：阳性菌株培养液pH≤4.5时呈红色，灵敏度0.01pH单位。

V-P试验：阴性菌株无红色反应，乙酰甲基甲醇转化率检测限0.1ppm。

柠檬酸盐利用：阳性菌株在Simmons斜面呈蓝色，pH响应范围6.0~7.6。

酶底物法快速检测：采用β-葡糖苷酸酶显色反应，检出限1CFU/10mL，耗时18±1小时。

检测范围

饮用水源：地表水、地下水及水库原水，监控粪便污染风险。

包装饮用水：瓶装水、桶装水成品，确保商业无菌要求。

乳制品：巴氏杀菌乳、奶酪，评估加工过程卫生控制。

肉制品：生鲜禽肉、熟食制品，检测屠宰与冷链卫生状况。

水产品：养殖鱼类、贝类，控制水域污染导致的生物累积。

果蔬农产品：沙拉用鲜切蔬菜，验证清洗消毒效果。

食品加工环境：设备表面涂抹样品，监控HACCP关键控制点。

医疗废水：医院排污系统出水，防止病原体环境扩散。

游泳池水：循环过滤系统末端水，保障公众健康安全。

化妆品原料：植物提取液、甘油等，控制微生物负载量。

检测标准

GB/T5750.12-2023生活饮用水标准检验方法：耐热大肠菌群多管发酵法

ISO9308-1:2014水质-大肠杆菌和大肠菌群计数-第1部分：膜过滤法

GB4789.3-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数

EPAMethod1604美国环境保护署标准：耐热大肠杆菌膜过滤测定

APHA9221B标准方法：水中总大肠菌群酶底物技术

ISO4831:2006食品和动物饲料微生物学大肠菌群计数水平法

GB17324-2003瓶装饮用纯净水卫生标准：耐热大肠菌群不得检出

ASTMD5392-14水中大肠菌群检测的酶底物法标准指南

检测仪器

恒温水浴振荡器：温控精度±0.1℃，提供44.5℃恒温培养环境促进目标菌生长。

全自动微生物定量系统：集成比色法与荧光检测，自动判读96孔板酶底物反应结果。

膜过滤装置：配备0.45μm孔径滤膜，实现样品中微生物高效截留与富集。

生物安全柜：ClassIIA2型，提供无菌操作环境防止样品交叉污染。

显微成像系统：1000×油镜观察，辅助革兰氏染色形态学验证。

多通道移液器：量程1μL~1000μL，误差≤0.5%，保证稀释梯度准确性。

微生物培养箱：温度均匀性±0.5℃，支持48小时持续恒温培养。

紫外分光光度计：波长范围190~900nm，检测培养液浊度变化。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。