乙醇脱氢酶检测

检测项目

乙醇脱氢酶活性：测定酶催化乙醇氧化为乙醛的反应速率，单位为U/mL，测量范围0.1~1000U/mL，精度±5%。

乙醇脱氢酶含量：采用免疫比浊法或ELISA法检测酶蛋白浓度，单位为mg/mL，检出限0.01mg/mL，线性范围0.05~10mg/mL。

米氏常数（Km）：反映酶对底物乙醇的亲和力，单位为mmol/L，测量范围0.1~100mmol/L，重复性±3%。

最大反应速率（Vmax）：酶完全饱和时的反应速率，单位为μmol/min，测量范围0.01~100μmol/min，误差±4%。

辅酶依赖性：检测酶对NAD+或NADH的依赖性，记录辅酶浓度对反应速率的影响，辅酶浓度范围0.1~10mmol/L，相关性系数≥0.99。

热稳定性：测定酶在不同温度（25~80℃）下的剩余活性，保温时间30分钟，活性保留率计算精度±2%。

pH optimum：确定酶活性最高时的pH值，pH范围4.0~10.0，步长0.5，重复性±0.1pH单位。

抑制剂敏感性：检测重金属离子（如Cu2+、Zn2+）对酶活性的抑制作用，抑制剂浓度0.01~1mmol/L，抑制率计算精度±3%。

底物特异性：比较酶对乙醇、丙醇、丁醇的催化活性，底物浓度10mmol/L，活性比值误差±5%。

酶动力学参数（kcat）：计算酶的周转数，单位为s-1，测量范围1~1000s-1，精度±6%。

酶纯度：采用SDS-PAGE法检测乙醇脱氢酶的纯度，条带分辨率≥1mm，纯度计算精度±1%。

贮存稳定性：测定酶在4℃、-20℃条件下的活性保留率，贮存时间1~6个月，活性变化率±3%。

检测范围

临床血液样品：用于肝脏疾病（如酒精性肝炎、肝硬化）患者的乙醇代谢能力评估。

酵母发酵液：监测生物乙醇生产过程中乙醇脱氢酶的活性变化，优化发酵条件。

细菌提取物：研究微生物乙醇代谢途径，筛选高产乙醇脱氢酶的菌株。

植物组织样品：分析植物对乙醇的解毒机制，如酿酒葡萄果实中的酶活性。

生物制品：检测重组乙醇脱氢酶制剂的活性和纯度，确保药用或工业用质量。

酒类产品：测定酒中乙醇脱氢酶的残留量，评估产品稳定性及安全性。

化妆品原料：检测化妆品中乙醇脱氢酶的含量，确保符合化妆品卫生标准。

环境水样：监测水体中乙醇脱氢酶的活性，指示有机污染程度。

饲料添加剂：评估饲料中乙醇脱氢酶对动物酒精代谢的促进作用。

基因工程菌：验证转基因菌株中乙醇脱氢酶的表达水平，优化基因工程工艺。

发酵食品：测定酱油、醋等发酵食品中乙醇脱氢酶的活性，评估发酵进程。

药物代谢研究：研究药物对乙醇脱氢酶活性的影响，预测药物与酒精的相互作用。

检测标准

GB/T 32465-2015 生物制品中乙醇脱氢酶活性测定方法

ISO 16634-2:2016 食品中酶活性测定 第2部分：乙醇脱氢酶

ASTM E2525-20 生物化学试剂 乙醇脱氢酶的标准试验方法

GB/T 23527-2009 酵母抽提物中乙醇脱氢酶活性的测定

ISO 20636:2018 临床化学 乙醇脱氢酶活性测定的参考方法

GB/T 18932.28-2005 蜂蜜中乙醇脱氢酶活性的测定

ASTM D7941-14 生物燃料生产中乙醇脱氢酶活性的标准测试方法

ISO 13365-1:2011 天然矿泉水中酶活性的测定 第1部分：乙醇脱氢酶

GB/T 30988-2014 化妆品中乙醇脱氢酶的测定 高效液相色谱法

ASTM E3089-17 环境样品中乙醇脱氢酶活性的标准试验方法

GB/T 21126-2007 小麦粉中乙醇脱氢酶活性的测定

ISO 22160:2007 乳及乳制品中酶活性的测定 乙醇脱氢酶

检测仪器

紫外-可见分光光度计：用于监测酶促反应中NADH或NAD+的吸光度变化，波长范围200~800nm，吸光度精度±0.001AU，用于乙醇脱氢酶活性测定。

酶标仪：采用ELISA法检测乙醇脱氢酶含量，支持96/384孔板，检测波长450nm，灵敏度0.01ng/mL，用于高通量样品分析。

恒温培养箱：控制酶促反应的温度条件，温度范围4~60℃，精度±0.5℃，用于热稳定性及pH optimum测定。

高速离心机：分离样品中的酶蛋白，转速范围1000~15000rpm，离心力最大20000×g，用于细菌或植物组织提取物的制备。

液相色谱仪：配备紫外检测器，分离纯化乙醇脱氢酶，柱温范围20~40℃，流速0.1~5mL/min，用于酶含量及纯度分析。

pH计：测量反应体系的pH值，精度±0.01pH，范围0~14，用于pH optimum测定。

电子天平：称量酶样品及试剂，精度0.1mg，最大量程200g，用于样品浓度配制。

磁力搅拌器：保持反应体系均匀，转速范围100~1500rpm，搅拌子尺寸5~20mm，用于酶促反应过程中的混合。

蛋白电泳仪：分离酶蛋白样品，凝胶浓度8%~15%，电压范围100~300V，用于酶纯度检测。

荧光分光光度计：检测酶与底物结合的荧光变化，激发波长340nm，发射波长460nm，用于动力学参数测定。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。