菌种保藏悬液检测

检测项目

活菌浓度：测定悬液中活的微生物数量，采用平板计数法或流式细胞术，测量范围10^1~10^9CFU/mL，计数误差≤5%。

纯度检测：检查悬液中是否存在杂菌或污染微生物，采用划线分离法结合生化鉴定，杂菌检出限≤1CFU/100mL，形态识别率≥95%。

传代稳定性：评估菌种在连续传代过程中遗传特性的保持能力，检测传代5~10次后的形态、生理生化特征及基因序列，变异率≤1%。

代谢活性：测定菌种的基础代谢能力，采用ATP荧光检测或葡萄糖利用率测定，ATP检测下限10^-12mol/L，葡萄糖利用率测量范围0.1~10mmol/Lh。

遗传特性：分析菌种的基因序列稳定性，采用PCR扩增结合测序技术，目标基因片段长度50~5000bp，序列一致性≥99.9%。

渗透压：测量悬液的渗透压值，采用冰点下降法，测量范围10~3000mOsm/kg，精度1mOsm/kg，确保渗透压符合菌种保藏要求。

pH值：检测悬液的酸碱度，采用高分辨率pH计，测量范围0~14pH，精度0.01pH，支持温度自动补偿（0℃~100℃）。

杂菌污染率：计算悬液中杂菌的比例，采用薄膜过滤法结合平板计数，污染率≤0.1%，过滤面积≥100cm，滤膜孔径0.45μm。

冷冻保护剂含量：测定悬液中冷冻保护剂（如甘油、DMSO）的浓度，采用高效液相色谱法或折光率法，测量范围1%~50%（v/v），精度0.5%。

复苏率：评估冷冻或干燥后菌种的复活能力，计算复苏后活菌数与保藏前的比值，复苏率≥80%，复苏培养时间≤48小时。

抗逆性：检测菌种对低温、干燥等保藏条件的耐受能力，采用梯度温度处理（-20℃~-196℃）或干燥处理后测定活菌数，存活率≥70%。

芽孢形成率：针对芽孢杆菌属菌种，测定悬液中芽孢的比例，采用加热处理（80℃10分钟）后计数，芽孢形成率≥90%。

检测范围

微生物资源库保藏悬液：用于国家或地方微生物资源库的菌种长期保存，如细菌、真菌、放线菌等的冷冻或干燥悬液。

生物制药用菌种悬液：生物制药过程中所用生产菌种的保藏悬液，如抗生素生产菌、胰岛素工程菌、疫苗生产菌等。

农业微生物菌种悬液：农业应用中的有益微生物保藏悬液，如固氮菌、解磷菌、生防真菌、动物益生菌等。

食品工业菌种悬液：食品发酵用菌种的保藏悬液，如酵母菌、乳酸菌、醋酸菌、酱油曲霉菌等。

环境微生物监测悬液：环境监测中分离的微生物保藏悬液，如污水中的降解菌、土壤中的功能菌、大气中的微生物等。

化妆品用益生菌悬液：化妆品中添加的益生菌保藏悬液，如乳酸杆菌、双歧杆菌、酵母菌等。

兽医微生物疫苗悬液：兽医疫苗生产用菌种的保藏悬液，如猪瘟杆菌疫苗株、禽流感疫苗生产菌、口蹄疫疫苗佐剂菌等。

科研实验用菌种悬液：科研机构用于实验的菌种保藏悬液，如模式菌株、突变菌株、基因工程菌株等。

工业酶生产菌种悬液：工业酶生产所用菌种的保藏悬液，如淀粉酶生产菌、蛋白酶生产菌、纤维素酶生产菌等。

水产养殖用有益菌悬液：水产养殖中用于改善水质的有益微生物保藏悬液，如硝化细菌、芽孢杆菌、光合细菌等。

饲料微生物添加剂悬液：饲料中添加的微生物添加剂保藏悬液，如枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、酵母菌等。

医疗诊断用菌种悬液：医疗诊断中所用标准菌种的保藏悬液，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等质控菌株。

检测标准

ISO11133:2014食品微生物学培养基制备和质量控制的标准方法

GB/T20366-2006芽孢杆菌属微生物农药菌种保藏技术规范

ASTME1493-20冷冻保藏微生物的标准指南

GB/T38480-2020微生物资源保藏总则

ISO20776-1:2006临床实验室检测感染性疾病的分子诊断第1部分：通用要求

GB/T13093-2006饲料微生物添加剂检验通则

ASTMD5465-20微生物培养基pH值测定的标准方法

ISO16204:2001微生物学酵母菌和霉菌计数的标准方法

GB/T27538-2011动物源性饲料中细菌总数的测定

GB/T18869-2019饲料添加剂枯草芽孢杆菌

ISO10272-1:2017微生物学沙门氏菌属检测第1部分：常规方法

GB/T4789.2-2016食品微生物学检验菌落总数测定

检测仪器

微生物计数仪：采用流式细胞术或成像分析技术，快速测定悬液中的活菌数量，测量范围10^1~10^9CFU/mL，计数速度≤30秒/样本。

PCR扩增仪：用于遗传特性检测中的基因扩增，支持梯度温度设置（4℃~99℃），扩增效率≥90%，可检测目标基因片段长度50~5000bp。

高分辨率pH计：测量悬液的酸碱度，精度0.01pH，测量范围0~14pH，支持温度自动补偿（0℃~100℃），用于确保悬液pH值符合保藏要求。

渗透压仪：采用冰点下降法测定悬液的渗透压值，测量范围10~3000mOsm/kg，精度1mOsm/kg，用于评估悬液的渗透压稳定性。

高效液相色谱仪：配备紫外或示差折光检测器，用于冷冻保护剂（如甘油、DMSO）含量的测定，检测下限0.01%（v/v），分离度≥1.5，确保保护剂浓度符合要求。

生物显微镜：配备相差物镜和数码成像系统，用于纯度检测中的微生物形态观察，放大倍数40~1000倍，分辨率≤0.2μm，可识别杂菌的形态特征。

ATP荧光检测仪：通过检测ATP含量反映菌种的代谢活性，检测下限10^-12mol/L，测量时间≤10秒，用于评估菌种的活力状态。

菌落计数器：采用图像识别技术，自动计数平板上的菌落数量，计数范围1~1000CFU/平板，误差≤2%，用于活菌浓度的平板计数法检测。

梯度PCR仪：用于遗传特性检测中的基因扩增，支持多通道同时反应，温度精度0.1℃，扩增效率≥95%，可检测多个目标基因。

冷冻离心机：用于悬液的浓缩或分离，转速范围1000~15000rpm，最大离心力≥20000g，温度控制范围-20℃~4℃，用于预处理检测样本。

生物安全柜：用于纯度检测中的划线分离操作，确保操作环境无菌，洁净等级ISO5级，气流速度0.38~0.53m/s，防止杂菌污染。

紫外分光光度计：用于活菌浓度的快速测定，通过检测OD600值反映微生物数量，测量范围0.001~2.000OD，精度0.001OD，用于辅助平板计数法验证。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。