抑制剂亲和力检测

检测项目

平衡解离常数测定：测定抑制剂与靶标在平衡状态下的解离常数，是亲和力最直接的量化指标。

结合速率常数测定：评估抑制剂与靶标结合的快慢，反映结合过程的动力学特性。

解离速率常数测定：评估已结合的抑制剂从靶标上脱离的快慢，与药效持续时间相关。

半数抑制浓度测定：在功能性实验中，使靶标活性降低50%所需的抑制剂浓度。

选择性指数评估：比较抑制剂对主靶标与脱靶靶标的亲和力差异，评估其选择性。

竞争性结合分析：确定抑制剂是否与已知配体竞争同一结合位点，判断结合模式。

变构效应检测：鉴定抑制剂是否通过变构位点结合并调节靶标活性。

热稳定性偏移检测：通过测量靶标蛋白热稳定性变化来间接评估抑制剂结合。

细胞水平亲和力验证：在更复杂的细胞环境中验证抑制剂的结合效力与功能。

结构-活性关系支持：为化合物结构优化提供关键的亲和力数据支持。

检测范围

激酶抑制剂：针对各类蛋白激酶靶点，是肿瘤药物研发的重要领域。

蛋白酶体抑制剂：用于研究蛋白质降解途径及相关疾病治疗。

G蛋白偶联受体拮抗剂/激动剂：针对最大类药物靶标家族，评估配体与受体的相互作用。

离子通道阻滞剂：评估药物对神经、心血管系统离子通道的调控作用。

表观遗传学靶点抑制剂：如针对组蛋白去乙酰化酶、甲基转移酶的抑制剂。

核酸结合蛋白抑制剂：如转录因子、解旋酶等靶向药物的亲和力检测。

病毒酶抑制剂：针对病毒复制关键酶，如HIV蛋白酶、逆转录酶等。

代谢酶抑制剂：用于糖尿病、高血脂等疾病相关代谢通路研究。

磷酸酶抑制剂：研究细胞信号转导中去磷酸化过程的关键工具。

蛋白-蛋白相互作用抑制剂：针对难以成药的PPI界面，评估其阻断能力。

检测方法

表面等离子共振技术：实时、无标记监测生物分子间相互作用动力学和亲和力的金标准方法。

等温滴定量热法：通过测量结合过程的热变化，直接获得热力学参数。

微量热泳动技术：基于分子在温度梯度中的运动变化，快速测定溶液中的亲和力。

荧光偏振/各向异性：利用荧光标记配体结合前后偏振光变化，进行竞争性结合分析。

时间分辨荧光共振能量转移：高灵敏度、低背景的均相检测方法，适用于高通量筛选。

酶联免疫吸附测定：基于固相和抗体识别的经典方法，用于特定体系的亲和力比较。

放射性配体结合分析：使用放射性标记配体进行竞争实验，灵敏度极高。

生物膜层干涉技术：实时、无标记的光学技术，用于测量分子结合的质量变化。

差示扫描荧光法：通过监测蛋白热变性曲线偏移，快速初筛潜在结合分子。

核磁共振波谱法：提供原子水平的结合信息，可用于片段筛选和结合位点定位。

检测仪器设备

表面等离子共振仪：如Biacore系列，是实现实时、无标记相互作用分析的核心设备。

等温滴定量热仪：如MicroCal ITC，用于精确测量结合过程中的焓变和熵变。

微量热泳动仪：如Monolith系列，所需样品量少，检测速度快，适用范围广。

多功能酶标仪：具备荧光偏振、时间分辨荧光、吸光度等多种检测模式的高通量平台。

荧光光谱仪：用于精确测量荧光强度、光谱变化，辅助亲和力分析。

圆二色光谱仪：监测蛋白质二级结构变化，间接反映配体结合引起的构象改变。

分析型超速离心机：通过沉降速度或平衡实验分析复合物的形成和分子量。

生物膜层干涉系统：如FortéBio Octet系列，提供无需固定、高通量的实时结合数据。

差示扫描量热仪：高精度测量蛋白质热稳定性，用于评估配体结合对稳定性的影响。

高场核磁共振波谱仪：提供最详细的分子结构和动态相互作用信息，用于高难度靶标研究。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。