刺盘孢PCR检疫检测

检测项目

刺盘孢属特异性基因鉴定、炭疽病致病菌株分型检测、ITS序列分析、β-tubulin基因扩增、GAPDH基因验证、CAL基因片段筛查、CHS基因特异性识别、ACT基因序列比对、TEF-1α区域扩增、ApMat位点分型测试、GS基因多态性分析、SOD酶编码区验证、PG酶活性相关基因检测、细胞壁降解酶基因筛查、产孢相关基因表达量测定、致病力基因簇定位分析、抗药性突变位点监测、温度敏感性基因鉴定、寄主专化型分子标记识别、次生代谢产物合成基因筛查、毒素合成相关基因验证、菌丝生长调控基因分析、孢子萌发相关因子检测、附着胞形成关键基因测试、侵染钉发育分子标记识别、细胞程序性死亡诱导因子筛查效应子蛋白编码基因验证MAP激酶通路相关基因分析HSP70热激蛋白编码区测试黑色素合成途径关键酶基因鉴定

检测范围

新鲜植物病斑组织样本采集样本离体培养菌株土壤浸出液种子表面附着物果实腐烂部位茎秆维管束切片叶片气孔刮取物根际微生物群落样本温室基质样品灌溉水沉淀物包装材料残留物仓储环境拭子农用器械表面取样花粉载体样本昆虫介体体内分离物有机肥发酵产物组培苗污染源筛查嫁接接口愈伤组织苗木根系分泌物果实蜡质层提取物枝条韧皮部渗出液花朵蜜腺分泌物芽接部位创伤液树皮溃疡面刮取物木质部导管汁液叶柄基部渗出液种子内部胚乳样本果实贮藏期腐烂物

检测方法

常规PCR法：通过设计属/种特异性引物进行靶标DNA扩增，结合电泳分析产物大小实现初步鉴定
实时荧光定量PCR：采用TaqMan探针或SYBRGreen染料法进行定量分析，评估病原菌载量
多重PCR技术：同步扩增多个特征性基因片段，提升复合侵染情况下的鉴别效率
巢式PCR方案：通过两轮扩增提高低浓度样本的检出灵敏度
数字PCR系统：采用微滴分割技术实现绝对定量分析
HRM熔解曲线分析：基于扩增产物熔解特性差异进行快速分型
LAMP环介导扩增：适用于现场快速筛查的恒温扩增技术
宏基因组测序法：对复杂样本进行高通量测序后生物信息学分析
DNA微阵列芯片：通过杂交信号同步检测多种靶标序列
CRISPR-Cas12a辅助检测：结合核酸酶活性实现可视化结果判读

检测标准

GB/T36851-2018植物病原真菌分子生物学检测规范
SN/T5364.1-2022进出境植物检疫分子生物学方法第1部分：通用要求
ISO/TS17822-1:2020植物病害分子诊断技术指南
EPPOPM7/98(2)刺盘孢属检疫鉴定规程
APHISPPQProtocolCPHST-BL-001炭疽病菌分子鉴定程序
JISK0850:2021植物病原真菌PCR检测通则
GB/T38582-2020植物病原微生物实时荧光PCR检测方法
NY/T4017-2021农作物种子健康检验分子生物学规程
AS5013.25-2020食品微生物学检验PCR法测定植物病原真菌
T/CACM015-2020中药材及饮片真菌污染分子生物学检验规范

检测仪器

梯度PCR仪：用于优化退火温度参数的核心扩增设备
实时荧光定量PCR系统：配备多通道光学模块的定量分析平台
全自动核酸提取工作站：集成磁珠法纯化流程的高通量处理系统
电泳成像系统：配备紫外透射光源的凝胶分析装置
超微量分光光度计：用于DNA浓度与纯度快速测定
恒温金属浴：提供精确温度控制的核酸裂解环境
生物安全柜：达到II级防护标准的核酸操作平台
冷冻离心机：实现低温条件下的细胞碎片分离
超纯水制备系统：提供无核酸酶污染的实验用水
数字PCR微滴生成仪：制备均一化反应单元的精密设备

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。