pcr荧光检测

检测项目

实时荧光定量PCR：定量检测特定DNA序列的拷贝数，参数包括检测下限1 copy/μL、动态范围10^2-10^9 copies/μL、扩增效率90-110%。

熔解曲线分析：鉴定PCR产物特异性，参数如熔解温度（Tm）偏差<0.5°C、曲线分辨率0.1°C、单峰判定标准。

多重PCR检测：同时检测多个目标序列，参数包括多通道荧光检测能力（如4-6通道）、交叉反应抑制率<5%、目标间干扰系数。

数字PCR：绝对定量DNA目标，参数如分区数20,000、检测精度±5%、拷贝数变异系数<10%。

RT-PCR：检测RNA目标序列，参数如逆转录效率>90%、RNA完整性指数RIN>7、降解阈值。

高分辨率熔解曲线：识别单核苷酸多态性，参数如分辨率0.1°C、突变检出率>95%、峰形分析算法。

抑制物检测：评估样本中抑制物影响，参数如内控基因Ct值变化<2、抑制指数计算、回收率80-120%。

扩增效率评估：计算PCR反应效率，参数如标准曲线斜率-3.3至-3.8、R^2值>0.99、效率偏差校正。

特异性验证：确认引物探针特异性，参数如非目标扩增阴性率100%、熔解曲线单峰判定、背景荧光阈值。

灵敏度分析：确定检测下限，参数如LOD 10 copies/reaction、LOQ 100 copies/reaction、重复性CV<15%。

产物大小确认：通过凝胶电泳或毛细管电泳，参数如片段大小误差±5 bp、分辨率1 bp、峰面积积分。

荧光背景校正：减少非特异性信号干扰，参数如背景扣除算法、信噪比>10、基线漂移补偿。

动态范围验证：评估线性响应，参数如线性相关系数>0.98、范围跨越6个数量级、稀释系列测试。

重现性测试：确保结果一致性，参数如批内变异<5%、批间变异<10%、重复样本数≥3。

检测范围

临床诊断样本：包括血液、唾液、组织活检，用于病原体如SARS-CoV-2、流感病毒检测，支持传染病快速诊断。

食品和饲料样本：涵盖肉类、蔬菜、谷物，检测食源性病原体如沙门氏菌、大肠杆菌，确保食品安全监控。

环境监测样本：涉及水、土壤、空气颗粒物，检测微生物污染如军团菌、真菌孢子，用于污染源追踪。

法医鉴定样本：包括毛发、骨骼、体液，进行DNA分型和身份鉴定，应用于犯罪现场分析。

农业和植物样本：涵盖作物组织、种子、土壤，检测转基因成分或植物病原体，支持作物育种。

兽医和动物样本：涉及动物血液、组织、排泄物，检测动物疾病如禽流感、口蹄疫病毒。

药物和生物制品：包括疫苗、细胞治疗产品，监测基因表达或残留DNA，用于质量控制。

研究实验室样本：涵盖细胞培养、细菌菌落，用于基因编辑验证或表达谱分析，支持基础研究。

工业发酵样本：涉及发酵液、生物反应器内容物，监控微生物群落或工程菌株，优化生产过程。

法医毒物样本：包括血液、尿液，检测药物滥用或毒素基因标记，应用于毒理学分析。

水质处理样本：涵盖饮用水、废水，检测指示微生物如大肠菌群，用于环境合规性评估。

化妆品和个人护理品：包括乳液、洗发水，检测微生物污染或防腐剂有效性，确保产品安全。

转基因生物检测：涉及种子、加工食品，鉴定转基因作物如玉米、大豆，符合法规要求。

检测标准

ISO 22174:2005 食品和动物饲料中病原体检测的PCR方法，规定样本处理、引物设计和验证程序。

GB/T 19495.2-2004 转基因植物及其产品检测 PCR方法，定义DNA提取、扩增条件和结果判读标准。

ASTM E2149-01 实时荧光PCR检测的通用指南，涵盖仪器校准、数据分析和质量控制要求。

ISO 17822:2020 体外诊断医疗器械 PCR检测性能评估，包括灵敏度、特异性和精密度测试规范。

GB/T 30988-2014 多聚酶链反应（PCR）检测方法通则，规定实验设计、污染控制和报告格式。

ISO 20395:2018 生物技术 核酸定量 实时荧光PCR，涉及标准曲线建立、效率计算和不确定度评估。

ISO 15216:2017 食品中病毒检测的分子方法，指定RNA提取、RT-PCR参数和阳性对照设置。

GB/T 35883-2018 饲料中动物源性成分检测 PCR方法，定义物种特异性引物探针和熔解曲线分析。

ISO 12869:2012 水质检测的分子方法，涵盖水样本处理、PCR扩增和结果确认步骤。

ASTM D7786-13 环境样本中微生物检测的PCR标准，包括土壤DNA提取和抑制物评估协议。

GB/T 34798-2017 核酸提取纯化试剂盒性能评价，规定提取效率、纯度和回收率测试方法。

ISO 22949-1:2021 分子体外诊断检测的术语和定义，统一PCR相关术语和报告要求。

检测仪器

实时荧光PCR检测仪：仪器用于实时监测PCR扩增过程中的荧光信号变化，功能包括温度循环控制、多通道荧光检测和数据实时采集，支持定量分析和熔解曲线生成。

熔解曲线分析系统：设备分析PCR产物熔解特性，功能包括高分辨率温度斜坡控制、荧光强度监测和Tm值计算，用于特异性验证和突变检测。

核酸自动提取工作站：系统自动化处理样本DNA/RNA提取，功能包括裂解、结合、洗涤和洗脱步骤集成，确保样本纯度和回收率一致性。

微流体PCR平台：设备采用微反应腔室进行PCR，功能包括高通量样本处理、集成荧光检测和温度梯度优化，适用于快速筛查和低体积样本。

荧光定量PCR读取器：仪器检测PCR终点荧光信号，功能包括多孔板扫描、信号强度量化和背景校正，用于终点法分析和验证。

分光光度计：设备测量核酸浓度和纯度，功能包括紫外-可见光吸收光谱分析、A260/A280比值计算，用于样本质量控制。

毛细管电泳系统：仪器分离和检测PCR产物大小，功能包括荧光标记片段分析、大小分辨和峰面积积分，用于产物确认和定量。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。