全血基因组dna的提取实验报告检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

本报告详述全血基因组DNA提取的专业检测流程,重点关注样本处理、提取效率、纯度评估及完整性验证等关键指标。检测确保DNA质量符合后续分子生物学分析的标准要求,涵盖浓度、污染残留和生物安全性评估。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

DNA浓度测定:使用紫外分光光度法测量,参数包括线性范围10-500 ng/μL,精度误差小于±5%,确保样本加载量准确性。

DNA纯度分析:评估A260/A280比值,标准值1.8-2.0,检测偏差控制在±0.05以内,排除蛋白质和有机物干扰。

DNA完整性检测:通过琼脂糖凝胶电泳验证,观察片段大小分布,目标平均长度大于20 kb,条带清晰无降解。

提取效率计算:基于起始样本量和回收DNA量,计算回收率百分比,目标值≥90%,变异系数低于10%。

蛋白质残留评估:采用Bradford法测定,残留量上限为50 μg/mL,检测灵敏度达1 μg/mL,确保无酶抑制风险。

RNA残留检测:通过DNase处理前后比较分析,残留RNA比例小于5%,定量限0.1 ng/μL,避免PCR干扰。

盐离子残留测试:测量电导率值,换算为NaCl当量浓度上限5 mM,精度±0.1 mM,防止下游反应抑制。

酶活性残留筛查:执行PCR抑制试验,目标无扩增抑制现象,检测限为0.5单位残留酶活性。

细菌污染检测:采用16S rRNA PCR法,结果阴性地确认样本无菌污染,灵敏度识别10拷贝/μL污染物。

人类DNA特异性验证:通过STR分型分析,确认样本来源一致性,等位基因检出率高于98%,排除交叉污染。

样本均一性评估:测量多个平行样本间DNA浓度变异系数,目标小于10%,确保批次一致性。

重金属残留分析:原子吸收光谱法测定铅、镉等残留,限值小于0.1 ppm,精度±0.01 ppm,保障生物安全。

检测范围

新鲜静脉全血样本:适用于常规遗传病筛查和研究,需在采集后24小时内处理以保持DNA活性。

EDTA抗凝血样:广泛用于临床诊断,抗凝剂防止凝血,便于长期存储和DNA稳定性测试。

肝素抗凝血样:特定提取方法的适用样本,抗凝特性适合高灵敏度分析如肿瘤基因组学。

冷冻保存全血样本:长期生物样本库材料,解冻后提取评估冷冻损伤对DNA完整性的影响。

干血斑样本:新生儿筛查常用载体,通过滤纸吸附血样,简化运输和存储过程。

法医血样证据:犯罪现场收集样本,重点检测低拷贝DNA提取和污染控制。

临床诊断样本:疾病相关研究如癌症或遗传病,强调提取效率和诊断适用性验证。

研究用动物全血:比较医学实验材料,适用于跨物种基因组分析。

古血样考古样本:历史遗迹提取,处理降解DNA的特殊检测要求。

高通量筛查样本:自动化平台处理批量血样,优化通量和一致性。

免疫沉淀后血样:ChIP-seq等表观遗传研究,检测结合DNA的纯度和完整性。

移植排斥监测样本:器官移植后血样,聚焦微量DNA提取和特异性分析。

检测标准

ASTM E1342-22:规范DNA定量紫外分光光度法标准流程,确保测量精度和可重复性。

ISO 18385:2016:定义法医DNA分析最小要求,涵盖提取污染控制和样本完整性验证。

GB/T 19495.1-2004:分子生物学检测通用标准,适用于全血DNA提取效率和纯度评估。

ISO 21571:2005:食品安全DNA提取指南,扩展应用于血样污染物残留检测。

GB 5009.6-2016:食品中核酸提取方法标准,参考用于盐离子和酶残留测试。

EN ISO 9001:2015:质量管理体系要求,确保检测过程规范化和文件化。

ISO 17025:2017:检测实验室能力通用准则,涵盖仪器校准和数据验证。

GB/T 30988-2014:生物样本DNA提取技术规范,指定样本处理和存储条件。

ASTM D7785-20:DNA纯度测定标准方法,指导A260/A280比值分析流程。

ISO 20395:2018:生物样本完整性评估规范,适用于凝胶电泳检测参数设定。

GB/T 35816-2018:高通量核酸提取技术标准,自动化处理血样检测要求。

ISO 22174:2005:微生物DNA检测通用原则,参考用于细菌污染筛查。

检测仪器

紫外-可见分光光度计:测量DNA浓度和A260/A280比值,精度达±0.001 Abs,支持微量样本分析。

琼脂糖凝胶电泳系统:评估DNA完整性和片段大小,配备紫外透射仪,分辨率0.1 kb,可视化降解程度。

实时荧光定量PCR仪:检测残留污染物如RNA或细菌DNA,灵敏度0.1拷贝/μL,执行抑制试验。

高速冷冻离心机:分离血细胞和血浆,转速范围0-20,000 rpm,温度控制±1°C,确保样本均匀分离。

自动化核酸提取工作站:高通量处理血样,集成裂解和纯化步骤,通量96样本/批次,减少人为误差。

微孔板阅读器:用于酶联残留测定如蛋白质检测,波长范围200-800 nm,精度±2%,支持高通量筛查。

生物分析仪:精确分析DNA片段分布,基于毛细管电泳技术,分辨率1 bp,评估完整性参数。

原子吸收光谱仪:检测重金属残留,检出限0.01 ppm,确保样本生物安全性符合标准。

电导率测试仪:测量盐离子残留,范围0.1-100 mS/cm,精度±0.5%,验证提取缓冲液清洁度。

恒温混匀仪:优化样本裂解过程,温度控制20-100°C,振荡频率可调,提升提取效率一致性。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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