桃树溃疡病菌快速检测

检测项目

病原菌分离培养、菌落形态鉴定、菌丝显微观察、分生孢子计数、致病性测定、ITS基因测序、β-tubulin基因分析、EF-1α基因扩增、LAMP快速检测、qPCR定量分析、抗药性基因筛查、细胞壁降解酶活性测定、毒素产生能力测试、温湿度适应性实验、寄主范围测定、菌株遗传多样性分析、代谢产物指纹图谱建立、抗生素敏感性试验、生物防治菌拮抗实验、土壤带菌量监测、病斑扩展速率测定、潜伏侵染期诊断、免疫胶体金试纸条开发、光谱特征识别建模、电子鼻挥发性物质检测、离体叶片接种试验、木质部导管堵塞评估、树皮浸出液pH值测定、抗氧化酶活性分析、病程相关蛋白表达量检测

检测范围

发病桃树枝干表皮组织、健康枝条韧皮部样本、新生病斑边缘组织块、溃疡处渗出液样品、根部腐烂组织切片、叶片黄化病斑样本、果园表层土壤样本（0-20cm）、灌溉水样过滤沉淀物、修剪工具表面拭子样本、嫁接刀接触面残留物、苗圃基质培养土样本、果实贮藏期病斑组织、花粉携带物离心沉淀物、昆虫介体体内分离物、有机肥发酵产物样本、雨水飞溅液膜收集样、防护网附着微生物样本、气溶胶沉降平板培养物、邻近作物交叉感染样本（如杏树李树）、实验室保存菌株活化培养物

检测方法

组织分离培养法：采用PDA选择性培养基进行病原菌纯化培养，通过菌落形态特征进行初步鉴定。

显微形态学法：使用光学显微镜观察分生孢子器形态特征及孢子尺寸测量（400油镜下测量50个孢子）。

分子生物学检测：基于ITS-rDNA序列设计特异性引物进行PCR扩增（引物对CPSF/CPSR），扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳验证。

实时荧光定量PCR：采用TaqMan探针法建立标准曲线（Ct值-拷贝数对应关系），实现病原菌绝对定量分析。

环介导等温扩增（LAMP）：开发BstDNA聚合酶介导的恒温扩增体系（63℃60min），通过浊度仪或显色剂判读结果。

免疫学检测：制备单克隆抗体开发胶体金试纸条，实现田间快速筛查（15min内显色判定）。

检测标准

GB/T35342-2017植物病原真菌分子检测通用要求

NY/T401-2020果树病害诊断技术规程

SN/T5365-2022进出境苗木溃疡病菌检疫鉴定方法

ISO16140-3:2021分子生物学方法验证规范

GB/T36837-2018植物病原真菌分离培养技术规范

DB37/T4079-2020桃树溃疡病综合防控技术规程

GB/T3543.5-1995农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定

NY/T396-2021农用水源环境微生物监测技术规范

ISO7218:2007食品和动物饲料微生物学检验通用要求

T/CAMA52-2021果园土壤微生物多样性评价指南

检测仪器

生物安全柜（Ⅱ级A2型）：用于病原微生物的安全操作，维持工作区洁净度达到ISO5级标准。

梯度PCR仪：配置96孔模块实现多靶点同步扩增，温度控制精度0.1℃。

实时荧光定量PCR系统：配备FAM/HEX双通道荧光检测模块，支持熔解曲线分析功能。

全自动核酸提取仪：采用磁珠法实现32样本/次并行处理，全程耗时≤45min。

超景深三维显微镜：配备微分干涉（DIC）模块和图像拼接软件（20~100物镜）。

酶标仪：支持450nm/630nm双波长测量模式，适用于ELISA和比色法分析。

恒温恒湿培养箱：温度控制范围4-60℃（0.5℃），湿度调节范围30%-95%RH。

超低温冰箱（-86℃）：配备温度监控报警系统，用于长期保存菌种及核酸样本。

电泳成像系统：配置紫外透射仪和CCD相机（500万像素），支持DNA条带密度分析。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）：用于蛋白质指纹图谱快速鉴定。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。