细胞周期测定检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

细胞周期测定检测是评估细胞增殖状态的核心技术,通过量化DNA含量分析G0/G1期、S期和G2/M期细胞比例。检测要点包括样本活性控制、荧光染料选择、流式细胞术标准化及数据分析模型验证,确保周期分布结果的生物学准确性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

DNA含量定量分析:采用碘化丙啶染色法,测量细胞荧光强度与DNA含量的线性关系,分辨率±2% CV

S期细胞比例测定:通过BrdU掺入法检测DNA合成活性,标记效率≥95%,时间分辨率15min

G2/M期阻滞分析:量化有丝分裂期细胞占比,检测灵敏度0.5%群体比例变化

凋亡亚G1峰识别:区分亚二倍体凋亡细胞群,检出限1×10³个细胞

多倍体细胞检测:识别DNA指数>2N的异常细胞,可分析至8N多倍体

周期同步化验证:检测胸腺嘧啶阻断或诺考达唑处理后的周期同步率,同步效率≥85%

周期蛋白表达关联:联合检测Cyclin B1/D1/E表达与DNA含量,相关性R²≥0.92

RNA含量同步分析:采用Pyronin Y双染色法,区分G0与G1期细胞

SPF(S期分数)计算:通过积分法计算S期百分比,误差范围±1.5%

周期动力学建模:基于CFSE染色追踪细胞分裂代数,支持7代分裂轨迹重建

检测范围

肿瘤细胞系:包括HeLa、MCF-7等上皮源性癌细胞,适用于药物敏感性研究

原代免疫细胞:T/B淋巴细胞周期分析,需控制激活状态在0-72h时间窗

干细胞分化模型:胚胎干细胞向三胚层分化过程中的周期重编程监测

病理组织切片:石蜡包埋样本需进行脱蜡和抗原修复处理,最小样本量5μm切片

植物分生组织:拟南芥根尖分生区细胞周期同步化检测

病毒侵染细胞:流感病毒宿主细胞周期劫持效应量化分析

3D类器官培养:肠道类器官增殖动力学评估,需解离为单细胞悬液

药物筛选模型:化疗药物诱导的周期阻滞表型IC50值测定

衰老细胞鉴定:β-半乳糖苷酶染色联合周期分析,识别G0期滞留细胞

转基因动物模型:Cre-loxP系统诱导的周期调控基因功能验证

检测标准

ISO 21348:2007 流式细胞术DNA定量分析质量规范

GB/T 39730-2020 细胞周期测定技术通则

ASTM E2520-15 流式细胞仪分辨率验证标准指南

ICCS共识指南 人外周血淋巴细胞周期分析方案

GB/T 35823-2018 干细胞周期特性检测要求

ISO 20391-1:2018 细胞计数方法学验证规范

CLSI H56-A 流式细胞术性能验证标准

EJ/T 20185-2018 辐射诱导细胞周期阻滞检测规程

FDA Bioanalytical Method Validation 细胞分析方法验证

GB/Z 39502-2020 细胞检测样品制备规范

检测仪器

BD FACSAria III流式细胞仪:配置488nm/640nm双激光器,可实现7色荧光同步检测,用于多参数周期分析

Beckman Coulter CytoFLEX LX:配备120mW 405nm激光,支持Hoechst 33342染色UV激发检测

Sony SH800S细胞分选仪:集成96孔板自动分选模块,实现周期同步化细胞分离

Thermo Attune NxT声波聚焦流式仪:处理速度1×10⁵细胞/秒,适用于快速周期筛查

Millipore Muse细胞分析仪:台式微流控平台,整合Annexin V/PI三色周期-凋亡联检

Olympus ScanR高内涵系统:全自动显微成像分析,支持96孔板内细胞周期时空动态追踪

Agilent NovoCyte Advanteon:配置前向散射光检测模块,实现细胞体积-周期双参数关联分析

ChemoMetec NucleoCounter NC-3000:基于荧光图像分析,无需样本前处理直接检测固相培养细胞周期

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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