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蛋白泛素化实验检测
北检院检测中心 | 完成测试：次 | 2025-07-14
蛋白泛素化实验检测聚焦蛋白质翻译后修饰过程，涵盖泛素-蛋白酶体通路关键指标。检测涉及泛素化位点定位、修饰程度量化及底物特异性分析，采用免疫印迹、质谱联用等技术手段。
注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
泛素化位点鉴定：通过质谱技术识别蛋白质赖氨酸位点修饰；检测参数包括修饰位点坐标、肽段序列覆盖率
泛素链类型分析：解析泛素分子连接方式；检测参数包含K48/K63链占比、线性链丰度
修饰程度定量：测定目标蛋白泛素化水平；检测参数采用相对荧光强度或同位素比值
去泛素化酶活性：监测DUB酶催化效率；检测参数含酶解速率常数、底物消耗量
E3连接酶特异性：验证泛素转移酶作用靶点；检测参数记录底物结合常数、反应时间进程
泛素-蛋白酶体降解：跟踪底物蛋白降解动态；检测参数包含半衰期、降解产物积累量
多聚泛素化检测：分析链长分布特征；检测参数含高分子量复合物迁移率
泛素化动力学：测定修饰反应速率；检测参数采用时间梯度样本的修饰率变化
单泛素化与多泛素化区分：识别修饰分子数量；检测参数依据分子量位移差异
泛素结合域互作：验证受体蛋白识别能力；检测参数包含结合解离常数、复合物稳定性
检测范围
细胞裂解液样本：包含哺乳动物细胞或细菌表达系统提取物
重组蛋白体系：纯化后的目标蛋白与泛素化酶混合物
组织匀浆样本：来自疾病模型的脑/肝/肾组织提取液
体外翻译产物：无细胞表达系统合成的靶蛋白
免疫沉淀复合物：抗体捕获的蛋白-泛素结合物
临床病理标本：肿瘤组织切片中的泛素化标志物
药物筛选模型：小分子抑制剂处理的细胞样本
转基因生物样本：过表达泛素化酶系的小鼠组织
亚细胞组分：分离的细胞核/线粒体/胞浆蛋白
病毒宿主互作体系：感染过程中的病毒蛋白修饰
检测标准
ISO20184-1:2016蛋白质修饰检测通用要求
GB/T34800-2017蛋白质翻译后修饰检测指南
ASTME3068-17质谱法鉴定蛋白修饰标准流程
ISO21378:2020免疫印迹定量分析规范
GB/T39530-2020细胞信号通路检测通则
ISO19685:2021蛋白酶体活性测定基准方法
检测仪器
高分辨质谱仪：精确测定分子量偏移，用于泛素化位点定位
荧光成像系统：实时监测活细胞泛素化过程，具备多通道捕获能力
毛细管电泳装置：分离修饰/未修饰蛋白变体，分辨率为0.01Da
表面等离子共振仪：量化蛋白质互作亲和力，检测限达pM级
微量热泳动仪：测定酶促反应热力学参数，温度控制精度±0.1℃
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验，获取相关数据资料;
出具检测报告。
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