细胞膜穿透性测试检测

检测项目

细胞膜穿透效率：衡量目标物质穿过细胞膜进入细胞内的比例，检测范围0~100%，精度5%。

穿透动力学常数：描述穿透过程的速率参数，包括最大穿透速率（Vmax）和米氏常数（Km），Vmax测量范围0~100nM/min，Km测量范围0~1000nM。

细胞内累积量：定量目标物质进入细胞后的总量，检测下限1pmol/10^6细胞，线性范围1pmol~100nmol。

穿透机制验证：分析穿透方式（主动运输/被动扩散/内吞作用），采用抑制剂实验或荧光共定位技术，分辨率≤100nm。

跨膜电势依赖性：评估穿透效率随细胞膜电势变化的关系，电势调节范围-100~+100mV，步长10mV。

温度依赖性：研究温度对穿透过程的影响，温度控制范围4~45℃，精度0.5℃。

pH依赖性：分析不同pH环境下的穿透效率，pH调节范围3~10，步长0.5。

竞争抑制实验：测定竞争性物质对穿透的抑制率，抑制率范围0~100%，精度3%。

膜完整性影响：检测穿透过程对细胞膜完整性的破坏程度，采用LDH释放法，检测范围0~100%，灵敏度1U/L。

载体逃逸效率：针对纳米载体，测量其进入细胞后从内吞体/溶酶体逃逸的比例，检测范围0~100%，分辨率2%。

细胞毒性关联分析：评估穿透过程伴随的细胞毒性，采用MTT法，细胞存活率检测范围0~100%，精度4%。

组织特异性穿透性：检测目标物质对不同组织来源细胞的穿透差异，涵盖肝细胞、肺细胞、癌细胞等至少5种细胞类型，差异分析采用t检验，P值阈值0.05。

检测范围

小分子药物：包括化疗药物、抗生素、靶向药物等，评估其穿过肿瘤细胞、正常细胞细胞膜的能力。

纳米载体系统：如脂质体、聚合物胶束、金纳米颗粒等，检测其穿透细胞膜进入细胞内的效率。

肽类药物：包括细胞穿透肽（CPPs）、治疗性多肽等，衡量其穿透细胞膜的能力及机制。

基因递送载体：如质粒DNA、siRNA、mRNA载体（脂质体、聚合物载体），评估其穿透细胞膜进入细胞核的能力。

中药有效成分：如生物碱、黄酮类、皂苷类等，检测其穿过肠道上皮细胞、靶器官细胞细胞膜的效率。

纳米医学材料：如量子点、碳纳米管、纳米纤维素等，评价其穿透细胞膜的能力及生物安全性。

病毒载体：如腺病毒、慢病毒、AAV载体等，检测其穿透细胞膜进入宿主细胞的效率。

蛋白质药物：如抗体、酶类药物等，衡量其穿透细胞膜进入细胞内发挥作用的能力。

化妆品功效成分：如透皮吸收成分、抗氧化成分等，评估其穿透皮肤角质细胞细胞膜的效率。

环境污染物：如重金属离子、有机污染物等，检测其穿透细胞膜进入细胞内的毒性作用。

农用化学品：如农药、生长调节剂等，评价其穿透植物细胞膜进入细胞内的效率及毒性。

检测标准

ISO21467:2021纳米技术——细胞穿透性测试指南

GB/T39868-2021纳米材料细胞膜穿透性测定荧光定量法

ASTME2834-19体外细胞穿透效率测试标准方法

ISO10993-5:2017医疗器械生物学评价——体外细胞毒性试验（用于关联穿透性与毒性）

GB/T21767-2008化学品体外红细胞膜通透性测试方法

OECDTG442E纳米材料细胞穿透性测定共聚焦显微镜法

ASTME3244-21药物递送系统细胞膜穿透动力学测试标准

GB/T38082-2019纳米载体细胞内递送效率测定流式细胞术法

ISO13022:2012表面化学分析——细胞穿透性评价

GB/T36208-2018化妆品成分细胞膜穿透性测试体外模型法

检测仪器

荧光显微镜：用于观察目标物质进入细胞内的位置及分布，分辨率≤200nm，支持多通道荧光成像。

流式细胞仪：定量分析细胞群体中穿透目标物质的细胞比例，检测速度≥10000细胞/秒，荧光检测灵敏度≤100molecules/cell。

高效液相色谱-质谱联用仪（HPLC-MS/MS）：定量测定细胞内目标物质的含量，检测下限≤1pg/mL，线性范围≥5个数量级。

共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）：三维重建细胞内目标物质的分布，空间分辨率≤100nm，支持活细胞实时成像。

微量热泳动仪（MST）：测量目标物质与细胞膜的结合亲和力，解离常数（KD）测量范围1pM~10mM，精度10%。

细胞计数分析仪：用于测定细胞浓度及存活率，支持自动计数，精度2%。

荧光分光光度计：定量检测细胞内荧光标记物质的含量，激发波长范围200~800nm，发射波长范围200~800nm，检测下限≤1nM。

酶标仪：用于MTT、LDH等细胞毒性及穿透效率的定量分析，检测波长范围400~750nm，灵敏度≤0.01OD。

透射电子显微镜（TEM）：观察目标物质（如纳米载体）进入细胞内的超微结构，分辨率≤0.1nm。

实时定量PCR仪（qPCR）：用于检测基因递送载体进入细胞后的表达效率，检测下限≤1copy/μL，线性范围≥7个数量级。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。