小鼠骨髓细胞微核试验实验检测

检测项目

微核细胞计数率：统计每1000个嗜多染红细胞(PCE)中含微核的细胞数量，检测限≤0.1‰。

PCE/NCE比值测定：嗜多染红细胞与成熟红细胞比例分析，正常范围1.0-1.5，反映骨髓细胞增殖活性。

剂量-效应关系验证：设置3个染毒剂量组+阴性/阳性对照组，剂量间距系数≥2.0。

染毒周期设计：经口灌胃或注射给药，连续2次间隔24小时，末次给药后24小时取样。

骨髓细胞悬液制备：股骨冲洗液离心梯度1000rpm×5min，沉淀浓度调整至2×10⁶ cells/mL。

染色体畸变关联分析：Giemsa染色后观察染色体断片率，与微核阳性率进行相关性验证。

细胞毒性评估：当PCE/NCE＜0.2时判定为强细胞毒性，需调整试验浓度。

微核形态学鉴定：直径1/5-1/20主核直径的圆形结构，边缘清晰且与主核无染色质连接。

自发微核率监测：阴性对照组微核率阈值≤0.3‰（CD-1品系）。

统计显著性分析：采用泊松分布检验，p＜0.01判定为遗传毒性阳性。

检测范围

药品临床前研究：化学合成药物、生物制剂及中药注射剂的遗传毒性筛查。

工业化学品登记：依据REACH法规对产量＞1吨/年的新化学物质进行强制检测。

农药登记评价：杀虫剂、除草剂等农用化学品的诱变性风险评估。

食品添加剂安全验证：防腐剂、着色剂及人工甜味剂的长期摄入风险分析。

化妆品原料管控：染发剂成分、紫外线吸收剂等透皮吸收物质的致突变性检测。

医疗器械浸提液测试：高分子材料溶出物及可沥滤物的体内遗传毒性评价。

环境污染物监测：水体多环芳烃、重金属等生态毒理指标评估。

辐射防护研究：电离辐射及紫外照射诱导的染色体损伤量化分析。

纳米材料安全性：粒径＜100nm的金属/聚合物微粒生物相容性验证。

职业暴露评估：化工从业人员血液样本的接触生物标志物追踪。

检测标准

OECD TG 474：哺乳动物红细胞微核试验国际标准操作规程。

GB 15193.5-2014：食品安全国家标准 骨髓细胞微核试验。

ISO 10993-3：医疗器械生物学评价第3部分：遗传毒性试验要求。

EPA OPPTS 870.5395：美国环保署遗传毒性测试指南。

ICH S2(R1)：人用药物遗传毒性试验和结果分析国际协调标准。

GB/T 28647-2012：化学品骨髓细胞微核试验方法。

JJF 1825-2020：微核试验自动分析仪校准规范。

GBZ/T 240.17-2011：职业接触毒物危害评价第17部分：微核试验。

检测仪器

全自动细胞离心涂片机：制备厚度≤5μm的均一骨髓细胞玻片，转速可调范围500-1500rpm。

荧光显微成像系统：配备488nm/594nm双波段滤光片，支持PCE特异性吖啶橙染色识别。

高通量细胞计数仪：采用图像识别算法，每小时可分析200张玻片的微核发生率。

低温生物样品库：-150℃深低温保存染毒样本，温控精度±0.5℃。

智能化灌胃给药系统：精密控制给药体积0.1-1.0mL，误差率≤0.5%。

梯度PCR仪：用于微核形成相关基因（如Bmn、Cdc20）的mRNA表达量检测。

流式细胞分选仪：通过CD71抗体标记分选PCE细胞群，分选纯度≥98%。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。