细胞凋亡综合实验检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

细胞凋亡检测是生物医学研究关键环节,涉及程序性细胞死亡的形态学、生化标志物分析。主要检测要点包括细胞形态变化观察、DNA片段化检测、caspase酶活性测定等,确保结果准确性和可重复性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

形态学观察:通过光学或荧光显微镜检测细胞核碎片化、凋亡小体形成特征,检测分辨率达0.5μm。

Annexin V-FITC/PI染色:评估细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻和膜完整性,定量凋亡细胞比例,检测灵敏度1×10⁴细胞/mL。

TUNEL检测:识别DNA片段化末端,使用荧光标记或比色法,检测范围1-100μg DNA样本。

Caspase-3活性测定:基于荧光底物水解,检测酶活性变化,动态范围0.1-100 U/mL。

线粒体膜电位检测:利用JC-1染料测定ΔΨm变化,评估早期凋亡事件,灵敏度±5mV。

Western blot分析:检测凋亡相关蛋白如Bax、Bcl-2表达和PARP裂解,定量精度≤±10%。

细胞周期分析:通过流式细胞术测定亚G1峰,评估DNA含量异常,分辨率0.1%细胞群体。

Hoechst 33342染色:核染色检测凋亡细胞核浓缩现象,适用细胞密度1×10⁵-1×10⁶ cells/mL。

MTT/CCK-8细胞活力检测:间接评估凋亡相关细胞存活率,线性范围0.1-2.0 OD单位。

Real-time PCR检测:定量凋亡相关基因如p53表达水平,检测下限10 copies/μL。

胞质细胞色素c释放测定:利用免疫荧光法检测线粒体蛋白释放,灵敏度0.1 ng/mL。

荧光共振能量转移分析:监测caspase底物剪切事件,时间分辨率0.1秒。

钙离子流检测:评估凋亡信号通路中钙稳态变化,精度±0.1 μM。

活性氧检测:通过DCFH-DA探针测定氧化应激水平,动态范围0.1-100 μM。

检测范围

癌症治疗研究:评估化疗药物或靶向疗法诱导肿瘤细胞凋亡效果。

神经退行性疾病研究:分析阿尔茨海默病或多发性硬化中神经元凋亡机制。

免疫学研究:探讨自身免疫疾病或感染中免疫细胞凋亡调控。

药物筛选平台:用于新药开发中凋亡诱导剂或抑制剂高通量测试。

干细胞生物学研究:评估干细胞分化或衰老过程中的凋亡控制。

毒理学评估:测试环境污染物或化学品对肝脏或肾脏细胞凋亡影响。

心血管疾病研究:分析心肌梗死或心力衰竭中细胞凋亡角色。

肝病模型研究:评估病毒性肝炎或酒精性肝损伤相关肝细胞凋亡。

衰老与再生医学:探讨组织老化中细胞凋亡与修复机制。

感染性疾病模型:研究细菌或病毒病原体诱导宿主细胞凋亡过程。

生殖医学研究:分析精子或卵细胞凋亡在不孕症中的作用。

皮肤生物学应用:评估紫外线辐射或烧伤模型中角质细胞凋亡。

骨代谢研究:探讨骨质疏松或关节炎中成骨细胞凋亡调控。

植物生理学研究:应用于农作物胁迫响应中细胞凋亡检测。

检测标准

ISO 10993-5:医疗器械生物相容性评估中细胞凋亡检测通用规范。

GB/T 16886.5:中国国家标准,等同ISO 10993-5,用于体外细胞毒性测试。

ASTM E2524:国际标准指南,细胞凋亡检测方法验证和质量控制。

ISO 17025:检测实验室能力通用要求,涵盖凋亡实验数据可靠性。

GB/T 27417:中国实验室质量控制标准,适用于凋亡检测方法确认。

FDA指南草案:药物非临床研究凋亡评估相关技术要求。

ISO 15189:医学实验室凋亡检测质量管理和能力认可标准。

GB/T 33215:细胞培养技术国家标准,包括凋亡实验样本处理。

ICH Q2(R1):国际协调会议指南,凋亡检测方法验证参数要求。

GB/T 16886.12:生物材料免疫毒性测试标准,涉及凋亡评估。

检测仪器

流式细胞仪:用于高速定量分析Annexin V/PI染色细胞群,支持多参数凋亡检测。

荧光显微镜:提供高分辨率形态学观察和荧光染色成像,适用于TUNEL或Hoechst检测。

微孔板阅读器:执行比色或荧光检测如caspase活性测定,实现高通量样本分析。

实时荧光定量PCR仪:定量凋亡相关基因表达变化,确保灵敏度和重复性。

Western blot系统:检测凋亡蛋白表达和修饰,包括电泳和成像功能。

细胞培养箱:维持恒温恒湿环境,支持凋亡诱导实验细胞培养。

离心机:用于细胞沉淀和样本制备,确保凋亡检测样本纯度。

酶标仪:配合微孔板进行吸光度或荧光读数,适用于活力或活性检测。

成像分析软件:处理显微镜或流式数据,自动定量凋亡细胞比例。

低温存储设备:保存凋亡相关试剂和样本,维持检测稳定性。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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