rna靶向测序检测

检测项目

目标区域捕获效率：评估探针对目标RNA序列的特异性结合能力，参数要求≥95%

基因表达定量分析：检测FPKM值精度误差±0.5%，动态范围1-10⁶拷贝数

融合基因检测：检出限0.1%突变等位基因频率，覆盖常见断裂点±50bp

可变剪接事件分析：支持≥98%已知剪接位点识别，内含子保留检出率85%

低频突变筛查：灵敏度0.5% VAF，覆盖深度≥1000X

RNA编辑位点鉴定：要求A-to-G转换识别准确率99.8%

病原体检测：涵盖病毒载量定量，检测下限50拷贝/μl

文库复杂度评估：要求Unique分子占比＞65%，有效数据率≥80%

批次间重复性：相关系数R²＞0.98，CV值＜5%

GC偏好性校正：控制GC含量20-80%区间覆盖率偏差≤10%

交叉污染监控：样本间混杂率阈值设定＜0.1%

插入片段分布：主流峰控制在150-250bp，偏离率＜15%

链特异性验证：反义链误读率＜0.01%

多基因panel验证：支持同步检测500+基因，均一性指数＞0.9

检测范围

肿瘤相关RNA标记物：包括实体瘤驱动基因转录本及融合基因检测

遗传病诊断样本：针对单基因病相关mRNA剪接异常分析

免疫组库研究：TCR/BCR多样性评估，覆盖V(D)J重组区域

药物代谢酶表达：CYP家族等药物响应基因定量检测

病原微生物检测：呼吸道病毒、血液病原体等RNA病原筛查

干细胞分化研究：多能性标志物表达动态监测

转录因子调控分析：ChIP-seq验证配套RNA表达检测

环状RNA鉴定：反向剪接位点特异性探针设计

单细胞转录组验证：批量样本关键基因表达复核

疫苗研发监控：mRNA疫苗完整性及表达效率测试

植物抗逆基因研究：胁迫响应相关转录本检测

外泌体RNA分析：微量样本（＞10ng）富集检测

神经退行性疾病：tau蛋白等病理因子剪接变异体检测

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-核酸测序方法验证要求

GB/T 37872-2019 高通量测序数据质量控制标准

CLSI MM19-A2 分子诊断方法验证指南

ISO/IEC 17025:2017 检测实验室通用技术要求

GB/T 34796-2017 核酸测序文库构建规范

CAP NGS验证指南(NGS.09版) 临床级panel验证标准

EMQN室间质评方案 融合基因检测能力验证

FDA QSR规范 体外诊断试剂生产质量管理

YY/T 1596-2017 高通量测序仪行业标准

检测仪器

高通量测序仪：采用边合成边测序技术，通量40-800M reads/run，完成DNA纳米球扩增与双端测序

自动化建库系统：整合片段化、末端修复、接头连接步骤，建库通量96样本/批次

杂交捕获仪：温度精度±0.2℃，实现目标区域特异性富集，捕获效率＞95%

生物分析仪：通过微流控电泳检测RNA完整性，RIN值分辨率0.1

qPCR仪：采用TaqMan探针法，定量检测文库浓度，动态范围10³-10¹¹拷贝/μl

超声破碎仪：可控片段化范围50-500bp，CV值＜8%

超微量分光光度计：检测限0.2ng/μl RNA，A260/A280精度±0.05

低温离心机：温控精度±1℃，支持最大离心力20,000×g

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。