sf9细胞的培养检测

检测项目

细胞存活率检测：采用台盼蓝染色法，活细胞比例≥95%，死细胞计数误差≤2%

细胞密度测定：血球计数板法，密度范围5×10⁵~1×10⁷ cells/mL，重复性RSD＜5%

细胞倍增时间监测：连续72小时采样，对数生长期DT=18-24小时

支原体污染检测：PCR法检测灵敏度≤10 CFU/mL，覆盖40种常见菌株

细菌真菌筛查：液体培养基培养14天，TSB/SDA培养基符合USP<71>标准

病毒载体滴度：空斑测定法，精确度±0.5 log10 PFU/mL

细胞形态学观察：倒置显微镜400×成像，异常形态检出率＞95%

葡萄糖消耗速率：生化分析仪检测，基准值0.8-1.2g/L/24h

乳酸积累量：酶电极法测定，阈值≤2.5g/L（培养72小时）

重组蛋白表达量：SDS-PAGE检测，分辨率可识别0.5μg/μL目标蛋白

细胞凋亡分析：Annexin V/PI双染，早期凋亡检出限1%

渗透压监测：冰点渗透压仪，培养液范围280-320mOsm/kg

检测范围

昆虫细胞-杆状病毒表达系统：用于重组蛋白大规模生产的过程监控

病毒载体生产体系：包括腺相关病毒、慢病毒等载体产品的细胞基质检测

疫苗开发用细胞库：主细胞库和工作细胞库的全面质控检测

细胞治疗原材料：作为基因修饰细胞的培养载体时进行安全性验证

膜蛋白研究模型：GPCR等跨膜蛋白表达的功能性验证

生物反应器培养工艺：从5L到2000L规模培养的过程参数检测

细胞冻存复苏体系：冻存液配方验证及复苏存活率检测

无血清培养基适配性：化学成分明确培养基的性能验证

生物类似药开发：治疗性蛋白生产的细胞系稳定性监测

细胞遗传稳定性：STR分析检测传代稳定性，覆盖9个基因座

生物安全风险评估：内源病毒因子筛查（Sf-RV检测）

细胞代谢组学研究：营养消耗与产物积累的动力学分析

检测标准

细胞计数执行ISO 20391-1:2018标准规范

无菌检测依据USP<71>及EP 2.6.1要求

支原体检测符合EP 2.6.7及JP XVII标准方法

细胞库检定参照ICH Q5D指导原则

病毒载体检测遵循ISO 13022:2012标准

细胞遗传分析采用ATCC ASN-0002规范

代谢产物检测参照GB/T 37840-2019标准

生物负载检测执行GB 4789.2-2016标准

细胞培养环境监控依据ISO 14644-1洁净度分级

残留DNA检测采用GB/T 38164-2019方法

检测仪器

倒置相差显微镜：配置10×/20×/40×物镜，用于细胞形态学实时观察和图像采集

自动细胞计数仪：双荧光通道检测，支持直径10-50μm细胞计数，容量0.5mL样本

流式细胞仪：配备488nm/640nm双激光器，实现多参数凋亡检测及细胞周期分析

多功能酶标仪：波长范围230-1000nm，支持动力学法葡萄糖/乳酸检测（精度±2%）

生物反应器系统：5L工作体积，实时监测DO/pH/Temp参数，控制精度±0.1单位

梯度PCR仪：温度均一性±0.5℃，支持支原体及病毒检测的多重扩增程序

电泳成像系统：紫外/蓝光双透射光源，可检测0.1ng/μL蛋白条带

冰点渗透压计：测量范围0-2000mOsm/kg，分辨率1mOsm/kg

恒温CO₂培养箱：温度控制±0.2℃，CO₂浓度误差≤0.1%，带在线监测模块

气相色谱质谱联用仪：检测培养基中挥发性代谢产物，检出限0.1ppm

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。