细胞核促进物检测

检测项目

细胞核促进物活性测定：通过体外酶促反应检测其对靶标蛋白的激活能力，检测范围0.1~100U/mL，重复性误差≤5%。

细胞核促进物含量定量：采用免疫比浊法测定样本中目标分子的浓度，线性范围1~1000ng/mL，最低检出限0.5ng/mL。

细胞核促进物亚细胞定位分析：通过免疫荧光染色观察其在细胞内的分布，分辨率≤0.2μm，荧光强度信噪比≥30:1。

细胞核促进物与DNA结合能力检测：利用电泳迁移率变动分析（EMSA）测定其对DNA片段的结合常数，解离常数（Kd）检测范围10^-9~10^-6M。

细胞核促进物mRNA表达水平检测：采用实时荧光定量PCR（qPCR）测定其转录水平，扩增效率90%~110%，批内变异系数≤3%。

细胞核促进物蛋白表达量检测：通过Western blot法检测目标蛋白的相对含量，线性范围1~50μg总蛋白，条带灰度分析误差≤4%。

细胞核促进物磷酸化修饰水平检测：利用磷酸化特异性抗体结合ELISA法，检测磷酸化位点的相对比例，检测灵敏度0.1pmol/mL。

细胞核促进物与靶标蛋白相互作用检测：采用免疫共沉淀（Co-IP）结合质谱分析，鉴定相互作用蛋白，质谱分辨率≥70,000（FWHM）。

细胞核促进物细胞内稳定性分析：通过cycloheximide chase实验检测其半衰期，时间分辨率15min，半衰期检测范围0.5~24h。

细胞核促进物基因启动子活性分析：利用luciferase报告基因assay测定其对启动子的激活作用，相对荧光素酶活性（RLA）检测范围0.1~100倍，背景信号≤100RLU。

检测范围

细胞株样本：肿瘤细胞株（如HeLa、A549）、正常细胞株（如HUVEC、WI-38）等，用于研究细胞核促进物在细胞模型中的功能。

组织样本：人体肿瘤组织（如肺癌、乳腺癌）、正常组织（如肝、肾）等，用于临床前或临床研究中的分子标志物检测。

生物体液：血清、血浆、脑脊液、尿液等，用于检测循环中的细胞核促进物含量，辅助疾病诊断。

药物筛选样本：候选药物处理后的细胞或组织样本，用于评价药物对细胞核促进物活性的影响。

基因工程样本：过表达或敲低细胞核促进物的细胞株、转基因动物组织等，用于功能研究。

发酵液样本：重组蛋白表达的发酵液（如大肠杆菌、CHO细胞发酵液），用于生产过程中的质量控制。

植物样本：植物组织（如叶片、根系）、植物提取物等，用于研究植物细胞核促进物的功能。

病毒样本：病毒感染的细胞或病毒颗粒，用于检测病毒编码的细胞核促进物活性。

干细胞样本：胚胎干细胞、诱导多能干细胞（iPSC）及其分化后代，用于研究发育过程中的细胞核促进物作用。

环境样本：环境微生物（如土壤细菌、海洋真菌）提取物，用于筛选新型细胞核促进物。

检测标准

ISO 20391-1:2018 生物技术-细胞培养中污染物检测-第1部分：一般要求。

GB/T 38477-2020 基因表达定量检测 实时荧光定量PCR法。

ASTM E1891-21 免疫组织化学染色法检测组织中蛋白质的标准指南。

ISO 15189:2022 医学实验室-质量和能力要求。

GB/T 21767-2008 动物源性饲料中动物源性成分检测 实时荧光PCR法。

ASTM E2526-21 蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测的标准指南。

ISO 10993-1:2018 医疗器械-生物学评价-第1部分：风险管理过程中的评价与试验。

GB/T 36787-2018 生物样品中核酸提取纯化及质量评价规范。

ASTM F3160-16 细胞内蛋白质定位检测的标准方法（免疫荧光法）。

GB/T 39761-2021 生物标志物检测 液相色谱-质谱联用法通则。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：用于细胞核促进物mRNA表达水平检测，支持96孔板格式，荧光检测通道≥4个，定量线性范围≥7个数量级。

激光共聚焦显微镜：用于细胞核促进物亚细胞定位分析，分辨率≤0.1μm，支持多荧光通道同时成像，具备3D重构功能。

高效液相色谱-质谱联用仪（HPLC-MS/MS）：用于细胞核促进物含量定量及修饰分析，色谱柱耐受压力≥1000bar，质谱检测限≤1pg。

蛋白质印迹系统：用于细胞核促进物蛋白表达量检测，电泳槽支持梯度凝胶电泳，转印效率≥90%，化学发光检测灵敏度≤1fg。

荧光素酶报告基因检测仪：用于细胞核促进物基因启动子活性分析，检测范围10^-12~10^-6mol/L荧光素，信噪比≥1000:1。

高速冷冻离心机：用于免疫共沉淀实验中的样本分离，转速≥15000×g，温度控制范围4~25℃，离心时间精度≤1s。

流式细胞仪：用于细胞核促进物在细胞群体中的表达分析，检测通道≥6个，每秒可分析细胞数≥10000个，荧光分辨率≤2%CV。

多功能酶标仪：用于细胞核促进物活性测定及ELISA检测，波长范围400~750nm，吸光度检测范围0~4.0OD，重复性误差≤1%。

冷冻切片机：用于组织样本的细胞核促进物检测，切片厚度范围1~50μm，温度控制范围-20~-10℃，切片平整度≤5μm。

生物安全柜：用于细胞株及组织样本的处理，防护等级≥BSL-2，气流速度0.38~0.53m/s，过滤效率≥99.99%（针对0.3μm颗粒）。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。