双染检测

检测项目

抗体特异性验证：检测抗体与目标抗原结合能力，参数包括阳性对照率≥95%、交叉反应率≤5%、亲和力常数Kd值

信号强度量化：测量染色信号相对强度，参数包括灰度值范围0-255、动态阈值设定、标准化系数1.2

背景噪声控制：评估非特异性染色水平，参数包括信噪比≥10:1、背景灰度值≤30、消光系数校准

共定位分析：检测两种标记物空间重叠，参数包括Pearson相关系数范围-1至1、Manders系数≥0.8、像素重叠率计算

抗原稳定性评估：监测样本处理中抗原保留度，参数包括固定时间优化24-48小时、温度控制25±1℃、降解率≤10%

染色均匀性测试：评估切片染色分布一致性，参数包括变异系数≤15%、区域扫描点间距100μm、灰度标准差

渗透深度量化：测量染色剂穿透组织层厚度，参数包括深度分辨率5μm、焦点平面校准、多层成像叠加

假阳性筛查：识别非特异性结合，参数包括阴性对照设置、阻断剂浓度0.1-1%、误判率≤2%

图像质量控制：确保显微镜成像清晰度，参数包括分辨率≥0.2μm、对比度调整范围20-80%、畸变校正

荧光淬灭评估：检测信号衰减时间，参数包括半衰期≥30分钟、光稳定性测试、淬灭率≤5%

染色剂兼容性测试：验证双染体系互不干扰，参数包括光谱重叠距离≥50nm、激发波长分离、互斥系数≥0.9

组织完整性检查：评估样本处理损伤，参数包括细胞破裂率≤5%、形态学评分系统、切片厚度一致性5μm

检测范围

癌症组织切片：用于肿瘤标志物双重检测，如乳腺癌HER2和Ki67共表达分析

神经退行性疾病样本：评估阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白和Tau蛋白共定位

炎症性疾病活检：检测类风湿关节炎中炎症因子和细胞浸润双重标记

心血管病理标本：分析心肌梗死区域坏死标记和新生血管形成

传染病病原体检测：用于HIV或肺结核双重免疫组化诊断

干细胞研究材料：监测多能干细胞标志物Oct4和Nanog表达

自身免疫性疾病组织：如狼疮肾脏活检中免疫复合物和补体沉积

发育生物学样本：胚胎组织中基因表达时空定位分析

药物毒理学切片：评估肝脏毒性中细胞死亡和再生标志

环境污染物暴露样本：污染物在肺组织中的累积与炎症响应双重检测

移植器官评估：排斥反应中免疫细胞浸润和供体特异性抗体

神经科学模型：帕金森病模型中α-突触核蛋白和神经炎症标记

检测标准

ISO 15189:2012 - 医学实验室质量和能力具体要求

GB/T 37223-2018 - 免疫组织化学检测规范

ASTM E3060-16 - 组织病理学图像分析标准指南

ISO 10993-18 - 医疗器械生物学评价第18部分：化学表征

GB/T 16886.5-2017 - 医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性

CAP Checklist ANP.22900 - 病理实验室抗体验证协议

ISO/IEC 17025:2017 - 检测和校准实验室能力通用要求

GB/T 35428-2017 - 细胞和组织染色技术规范

ASTM F2883-11 - 荧光显微镜校准标准

ISO 19001 - 质量管理体系在医学实验室应用

GB/T 30998-2014 - 生物样本处理与保存规范

检测仪器

荧光显微镜：提供高分辨率成像，用于观察双染信号空间分布和共定位分析

自动组织染色机：执行标准化染色流程，确保试剂施加均匀性和时间控制

图像分析软件：量化染色强度和背景噪声，支持像素级数据提取和统计报告

分光光度计：测量染色剂吸光度和荧光发射光谱，验证波长兼容性和信号稳定性

微孔板阅读器：高通量筛查样本荧光强度，适用于大规模验证测试

共聚焦显微镜：增强三维成像深度，用于渗透深度量化和伪影校正

组织切片机：制备标准厚度样本，确保切片一致性和完整性

温控孵育箱：维持抗原稳定性，控制染色反应温度和湿度参数

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。