测定细胞活性检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

细胞活性检测通过量化代谢功能、膜完整性等参数评估细胞生理状态,为药物筛选、生物材料相容性研究提供核心数据。关键检测点包括线粒体脱氢酶活性、凋亡标志物及增殖动力学分析,严格执行ISO 10993等国际规范。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

MTT比色法:基于线粒体琥珀酸脱氢酶还原黄色MTT为紫色甲瓒,检测波长570nm,线性范围10^3-10^6细胞/mL

ATP生物发光检测:量化细胞内ATP浓度,灵敏度0.1nmol/L,反映能量代谢状态

台盼蓝排斥试验:鉴别膜完整性受损细胞,染色浓度0.4%,计数误差<3%

LDH释放检测:测量胞浆乳酸脱氢酶泄漏量,波长490nm,细胞毒性判定阈值>15%释放率

Caspase-3活性分析:荧光底物Ac-DEVD-AMC水解检测,激发/发射380/460nm,灵敏度5pmol/min

Calcein-AM/PI双染:活细胞绿色荧光(494/517nm),死细胞红色荧光(535/617nm)

BrdU增殖检测:标记DNA合成期细胞,抗BrdU抗体ELISA法,检测限50个细胞/孔

线粒体膜电位JC-1检测:红(590nm)/绿(529nm)荧光比值量化ΔΨm变化,分辨率±5mV

Annexin V-FITC/PI凋亡检测:早期凋亡细胞膜磷脂酰丝氨酸外露定量,流式细胞术精度±2%

细胞周期PI染色:碘化丙啶结合DNA,流式检测G0/G1、S、G2/M期分布,CV值<5%

活性氧DCFH-DA检测:荧光探针氧化生成DCF,激发488nm/发射525nm,定量范围0.1-100μM

线粒体超氧化物MitoSOX检测:特异性靶向线粒体,激发510nm/发射580nm,灵敏度nmol级

检测范围

抗癌药物体外筛选:评估化合物对肿瘤细胞系的IC50值及作用机制

生物材料相容性测试:植入材料浸提液对L929成纤维细胞的增殖抑制率检测

疫苗效力评价:检测免疫佐剂对树突状细胞活化标志物CD83/CD86的表达影响

纳米材料毒性研究:量子点、碳纳米管等对肺泡上皮细胞线粒体功能的剂量效应

医疗器械浸提液测试:心血管支架金属离子释放对内皮细胞凋亡率的影响

细胞治疗产品质控:CAR-T细胞回输前活力检测,要求活率≥90%

环境污染物评估:重金属离子对斑马鱼胚胎细胞分裂抑制的EC50测定

化妆品安全性验证:防晒剂成份对HaCaT角质形成细胞ROS生成的刺激指数

组织工程支架评价:3D打印支架上骨髓间充质干细胞的Calcein-AM染色覆盖率

基因治疗载体测试:腺相关病毒转染后HEK293细胞凋亡小体计数

海洋生物活性物质筛选:海藻提取物对巨噬细胞NO分泌的调节作用

农药残留毒理分析:有机磷农药对神经母细胞瘤SH-SY5Y轴突生长的抑制浓度

检测标准

ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价-第5部分:体外细胞毒性试验

GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 第5部分:体外细胞毒性试验

ASTM E2526-08(2019) 荧光法测定细胞增殖的标准试验方法

USP 1046 细胞治疗产品活力检测规程

ISO 19007:2018 纳米技术-体外MTS法测定纳米颗粒细胞毒性

GB/T 39730-2020 细胞计数试剂盒(CCK-8)检测通则

OECD TG 432 体外3T3中性红摄取光毒性试验

ICH S2(R1) 药物遗传毒性检测中细胞存活率判定标准

ASTM F895-84(2018) 琼脂扩散法细胞毒性评价标准

ISO 20391-1:2018 细胞计数标准-第1部分:细胞计数方法

检测仪器

多功能酶标仪:配备570nm/650nm双波长滤光片,实现MTT、LDH等96/384孔板高通量检测,读板速度<15秒/板

流式细胞仪:配置488nm/640nm双激光器,同步检测Annexin V-FITC/PI双染凋亡群体及细胞周期分布

激光共聚焦显微镜:Z轴分辨率0.35μm,实现Calcein-AM/PI三维荧光断层扫描及线粒体JC-1动态成像

高通量活细胞分析系统:集成相位差显微与荧光模块,每孔每分钟采集细胞汇合度、形态学参数

生物发光检测仪:光电倍增管增益10^6,检测ATP发光信号时本底噪声<0.5RLU

全自动细胞计数器:双荧光通道识别台盼蓝染色细胞,计数精度±2%,支持5-200μm粒径细胞

微孔板离心机:最大RCF 1000×g,保障悬浮细胞染色后快速沉淀与清洗

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

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