石斛夜光丸的成分及含量检测

检测样品的基本信息

本品为棕色的水蜜丸、棕黑色的小蜜丸或大蜜丸；味甜而苦。

检测范围

石斛夜光丸、夜光丸、炒决明子、神气枯瘁、小儿劄目、圆翳内障·肝肾两虚证、石斛、青光眼、草决明、决明子、石斛夜光丸、夜光丸、炒决明子、神气枯瘁、小儿劄目、圆翳内障·肝肾两虚证、石斛、青光眼、草决明、决明子、圆翳内障、圆翳、白内障、疳眼、原发性青光眼、视神经萎缩、石斛属、石斛─金钗石斛、马鞭石斛、环草石斛、束花石斛、铁皮石斛、川石斛、金石斛属、千年润、淮南八公石斛万病散、石斛散、石斛酒、石斛汤、金钗石斛、石斛浸酒、复方鲜石斛颗粒、石斛丸、有瓜石斛、石斛夜光丸等。

参考检测方法

照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸二氢钾溶液[乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g（25：75），再以磷酸调节pH值为4.0]（30：70）为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加盐酸-甲醇（1：100）制成每1ml含50μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品水蜜丸，研碎，取1.5g，精密称定；或取小蜜丸，剪碎，取2.5g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇（1：100）的混合溶液25ml密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率40kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品含黄连以盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）计，水蜜丸每1g不得少于0.41mg；小蜜丸每1g不得少于0.27mg；大蜜丸每丸不得少于1.5mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm（茯苓）。纤维表面类圆形细胞中含细小圆形硅质块，排列成行（石斛）。纤维周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维（甘草）。纤维束鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显（黄连）。种皮石细胞淡黄色，壁波状弯曲，有时内含棕色物（枸杞子）。种皮表皮石细胞淡黄棕色，表面观类多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含暗棕色物（五味子）。石细胞长方形或长条形，直径50～100μm，纹孔较细密（天冬）。石细胞橙黄色，贝壳形，壁较厚，较宽一边纹孔明显（苦杏仁）。种皮细胞暗红棕色，表面观多角形至长多角形，有网状增厚纹理（青葙子）。种皮栅状细胞一列，其下细胞中含草酸钙簇晶及方晶（决明子）。花粉粒类圆形，直径24～34μm，外壁有剌，长3～5μm，具3个萌发孔（菊花）。油管含金黄色分泌物，直径约30μm（防风）。不规则碎块撕裂状，无色或稍有光泽，表面具多数纵向裂隙（山羊角）。 （2）取本品水蜜丸6g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸9g ，剪碎。加甲醇50ml，置水浴上加热回流1小时，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.4g，加甲醇20ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液对照药材溶液及对照品溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12：6：3：3：1）为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365mn）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置土，显相同的黄色荧光斑点。 （3）取川芎对照药材1g，加石油醚（60～90℃）10ml，浸泡30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取〔鉴别〕（2）项下的供试品溶液10μl及上述对照药材溶液5μ1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（17：3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光（365mn）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （4）取〔鉴别〕（2）项下的剩余供试品溶液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加在已处理好的聚酰胺柱（30～60目，内径为1.5cm，柱高为15cm，水湿法装柱）上，先用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，再用甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取新橙皮苷对照品、柚皮苷对照品，加乙醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以丙酮-醋酸-水（4：1：7）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干，置紫外光365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （5）取本品水蜜丸6g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸9g ，剪碎。加乙醚30ml，超声处理10分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣挥干，加水饱和的正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过。滤液用氨试液洗涤2次，每次15ml，再用正丁醇饱和的水15ml洗涤，弃去洗涤液，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg 1对照品、人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液10μ1、对照品溶液6μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （6）取本品水蜜丸6g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸9g ，剪碎。加甲醇20ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用 水20ml溶解，加盐酸2ml，置水浴中加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取决明子对照药材0.25g ，同法制成对照药材溶液。再取大黄素甲醚对照品、大黄酚对照品，加甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检研究院的服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。