细胞核活性检测

检测项目

细胞核DNA完整性检测：通过彗星实验评估DNA断裂情况，参数包括彗星尾长（0~200μm）、尾矩（0~100）、 olive尾矩（0~50）。

细胞核仁区嗜银蛋白（AgNOR）染色检测：反映核仁活性及细胞增殖能力，参数包括AgNOR颗粒数量（0~20个/细胞核）、颗粒面积（0~50μm²）、颗粒密度（0~10个/μm²）。

细胞核荧光素二乙酸酯（FDA）酶活性检测：通过酯酶水解FDA产生荧光反映细胞代谢活性，参数包括荧光强度（0~10000AU）、阳性细胞率（0~100%）、检测下限（1×10⁴个细胞/mL）。

细胞核Hoechst 33342染色活力检测：通过DNA结合荧光染料区分活细胞与死细胞，参数包括活细胞率（0~100%）、荧光均匀度（变异系数≤10%）、激发波长（350nm）。

细胞核ATP含量测定：通过荧光素酶催化荧光反应定量ATP水平，反映细胞代谢活性，参数包括ATP浓度（0.1~1000nM）、检测下限（0.01nM）、批内变异系数（≤5%）。

细胞核caspase-3活性检测：通过底物水解速率反映凋亡执行酶活性，参数包括酶活性（0~1000pmol/min/mg蛋白）、底物转化率（0~100%）、反应时间（30~120min）。

细胞核增殖抗原（Ki-67）表达检测：通过免疫荧光染色评估细胞增殖状态，参数包括Ki-67阳性率（0~100%）、平均荧光强度（0~5000AU）、抗体稀释比（1:100~1:500）。

细胞核线粒体膜电位（Δψm）检测：用JC-1荧光探针反映线粒体功能，参数包括红绿荧光比值（0~10）、阳性细胞率（0~100%）、激发波长（488nm/585nm）。

细胞核凋亡细胞比例检测（Annexin V/PI双染）：区分活细胞、凋亡早期及坏死细胞，参数包括凋亡细胞率（0~100%）、坏死细胞率（0~100%）、活细胞率（0~100%）。

细胞核自噬活性检测（LC3荧光puncta计数）：通过LC3蛋白定位评估自噬水平，参数包括puncta数量（0~50个/细胞核）、阳性细胞率（0~100%）、puncta面积（0~10μm²）。

细胞核端粒长度检测（实时荧光定量PCR法）：测量端粒相对长度，参数包括T/S比值（0~10）、变异系数（≤5%）、扩增效率（90%~110%）。

细胞核组蛋白乙酰化水平检测（ELISA法）：评估组蛋白修饰状态，参数包括乙酰化率（0~100%）、检测下限（1ng/mL）、批间变异系数（≤8%）。

检测范围

生物医药研发：新药候选化合物的细胞毒性评估，反映药物对细胞核增殖、凋亡及DNA损伤的影响。

细胞治疗产品：干细胞、CAR-T细胞等治疗用细胞的活性检测，确保临床应用中的细胞功能完整性。

肿瘤研究：肿瘤细胞增殖、凋亡及耐药性分析，为肿瘤靶向治疗提供分子生物学依据。

再生医学：组织工程种子细胞（如骨髓间充质干细胞）的活性评估，保障组织构建的有效性。

毒理学研究：环境污染物（如重金属、有机毒物）的细胞毒性检测，评估其对细胞核的损伤作用。

农业生物工程：转基因作物细胞的活性分析，监测基因修饰对细胞代谢及增殖的影响。

化妆品原料检测：化妆品成分（如防腐剂、美白剂）的细胞安全性评价，避免对细胞核造成不可逆损伤。

微生物学研究：病原微生物（如病毒、细菌）感染对宿主细胞核活性的影响，揭示致病机制。

神经科学研究：神经细胞凋亡及活性检测，探讨阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的发病机制。

干细胞研究：胚胎干细胞、诱导多能干细胞（iPSC）的增殖及分化能力评估，确保干细胞的多能性。

免疫细胞研究：T细胞、B细胞等免疫细胞的活性检测，评估免疫治疗（如免疫检查点抑制剂）的效果。

环境监测：水体、土壤中污染物对水生生物（如鱼类肝细胞）或植物细胞细胞核活性的影响，反映环境质量。

检测标准

GB/T 28872-2012 细胞培养用试剂质量要求：规定了细胞培养试剂对细胞核活性的影响评估方法。

ISO 10993-5:2018 医疗器械生物学评价 第5部分：体外细胞毒性试验：用于评估医疗器械材料对细胞核活性的影响。

ASTM E1398-91(2019) 彗星试验测定细胞DNA损伤的标准方法：规范了细胞核DNA完整性检测的操作流程。

GB/T 33682-2017 流式细胞术检测细胞凋亡的方法：明确了Annexin V/PI双染法的参数要求。

ISO 20391-1:2018 生物技术 细胞培养 第1部分：哺乳动物细胞培养的一般要求：涉及细胞核活性检测的质量控制。

GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 第5部分：体外细胞毒性试验：与ISO 10993-5一致，用于医疗器械的细胞核活性评估。

ASTM E2318-03(2018) 荧光素二乙酸酯（FDA）法测定细胞活力的标准试验方法：规定了FDA酶活性检测的操作步骤。

ICH S4(R2) 生殖毒性试验：要求评估药物对胚胎细胞核活性的影响。

GB/T 21767-2008 化学品 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：涉及细胞核染色体完整性的检测。

ISO 13485:2016 医疗器械 质量管理体系 用于法规的要求：要求企业对细胞核活性检测进行质量控制。

JIS T 0301:2019 医疗器械 细胞毒性试验方法：规定了细胞毒性试验中细胞核活性的评价指标。

EMA Guideline on Quality of Cell-Based Medicinal Products：要求细胞治疗产品的细胞核活性检测符合GMP标准。

检测仪器

荧光显微镜：配备汞灯或LED光源，支持350nm、488nm、585nm等激发波长，用于观察细胞核荧光染色结果（如Hoechst、Annexin V、LC3）。

流式细胞仪：具备4-8通道荧光检测能力，支持10000 cells/s的检测速度，用于定量分析活细胞率、凋亡率及Ki-67阳性率等指标。

酶标仪：支持吸光度（450nm、570nm）、荧光强度（Ex485/Em535）检测，用于ATP含量测定、caspase活性分析及ELISA检测。

实时荧光定量PCR仪：具备荧光信号实时监测功能，支持SYBR Green、TaqMan探针法，用于细胞核端粒长度、基因表达水平检测。

彗星试验分析系统：结合荧光显微镜与图像分析软件，支持彗星尾长、尾矩、olive尾矩的定量分析，用于评估DNA损伤程度。

激光共聚焦显微镜：具备高分辨率（≤0.2μm）三维成像功能，支持多通道荧光叠加，用于观察细胞核内荧光 puncta（如LC3自噬小体）的分布。

Western blot系统：包括电泳仪（电压0~300V）、转膜仪（电流0~500mA）、成像系统（灵敏度≤1pg蛋白），用于检测Ki-67、组蛋白乙酰化等蛋白表达。

全自动细胞成像系统：具备高通量（≥96孔板）成像能力，结合AI分析算法，用于大规模筛选药物对细胞核活性的影响。

细胞计数仪：采用图像识别技术，支持台盼蓝排斥试验，用于快速计数细胞数量及评估细胞活力（活细胞率≥95%为合格）。

线粒体膜电位检测系统：结合荧光分光光度计（Ex488/Em530/590），用于定量分析JC-1荧光比值，反映线粒体功能状态。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。