蓝莓酶活性比色法检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-09-02  

蓝莓酶活性比色法检测基于颜色反应原理,通过测量吸光度变化量化酶活性。关键点包括样品制备、反应条件控制、标准曲线建立和吸光度读数。该方法用于评估蓝莓产品酶活性水平,确保数据准确性和重复性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

多酚氧化酶活性:测定蓝莓中多酚氧化酶催化多酚氧化的能力。具体检测参数:反应时间10-30分钟,吸光度测量波长420 nm,酶活性单位U/g鲜重。

过氧化物酶活性:检测过氧化物酶氧化底物的速率。具体检测参数:底物浓度0.5 mM,温度30°C,吸光度测量波长470 nm,活性表达为ΔA/min。

超氧化物歧化酶活性:测量超氧化物歧化酶清除超氧阴离子的效率。具体检测参数:反应体系pH 7.8,温度25°C,抑制率50%对应酶量,单位U/mL。

过氧化氢酶活性:评估过氧化氢酶分解过氧化氢的能力。具体检测参数:底物浓度10 mM,反应时间5分钟,吸光度下降率 at 240 nm,活性计算为μmol H2O2/min/g。

葡萄糖氧化酶活性:测定葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖产生过氧化氢的速率。具体检测参数:葡萄糖浓度5-100 mM,pH 6.0,吸光度测量 at 510 nm using peroxidase-coupled assay。

纤维素酶活性:检测纤维素酶水解纤维素生成还原糖的量。具体检测参数:底物类型微晶纤维素,反应时间60分钟,温度50°C,还原糖测定 by DNS method at 540 nm。

果胶酶活性:测量果胶酶降解果胶释放还原糖的效率。具体检测参数:果胶浓度1%,pH 3.5,温度40°C,吸光度 at 550 nm for reducing sugars。

淀粉酶活性:评估淀粉酶水解淀粉生成麦芽糖的能力。具体检测参数:淀粉浓度2%,反应时间30分钟,pH 6.9,碘显色法 at 620 nm。

蛋白酶活性:测定蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的量。具体检测参数:底物浓度1%,反应时间30分钟,pH 7.5,吸光度 at 280 nm。

脂肪酶活性:检测脂肪酶水解甘油三酯生成脂肪酸的速率。具体检测参数:底物橄榄油乳液,pH 7.0,温度37°C,滴定法或吸光度法 at 410 nm using indicator。

检测范围

新鲜蓝莓果实:完整蓝莓鲜果用于酶活性基线测量。

蓝莓果汁产品:加工果汁中的酶活性残留评估。

蓝莓果酱制品:高糖含量产品酶稳定性检测。

蓝莓提取物:浓缩提取物中酶活性定量分析。

蓝莓干燥产品:脱水蓝莓的酶活性变化监测。

蓝莓发酵饮料:如蓝莓酒中的酶活性影响评估。

蓝莓保健食品:胶囊或片剂中酶成分检测。

蓝莓化妆品原料:提取物在护肤品中的酶活性控制。

蓝莓饲料添加剂:动物饲料中蓝莓成分酶活性分析。

蓝莓育种材料:不同品种蓝莓的酶活性比较研究。

检测标准

ISO 6658: Sensory analysis methodology for general guidance。

ISO 14502-1: Determination of substances characteristic of green and black tea — Part 1: Content of total polyphenols in tea — Colorimetric method。

ASTM E1899: JianCe guide for enzyme assays。

GB/T 5009.6: Food safety national standard for determination of fat in foods。

GB/T 5009.124: Determination of amino acids in foods。

GB/T 21918: Determination of peroxidase activity in fruit and vegetable products。

ISO 21571: Foodstuffs — Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products。

GB/T 22244: Determination of polyphenols in foods。

检测仪器

紫外-可见分光光度计:用于测量酶反应产物的吸光度变化。具体功能:波长范围200-800 nm,精度±0.001 Abs,用于定量酶活性。

酶标仪:高通量读取多孔板吸光度值。具体功能:支持96或384孔板,温度控制,用于快速筛查酶活性。

pH计:精确测量和调节反应体系pH值。具体功能:精度±0.01 pH单位,确保酶最佳反应条件。

恒温水浴锅:维持酶反应所需恒定温度。具体功能:温度范围20-100°C,稳定性±0.1°C,用于温度敏感检测。

离心机:分离样品中的固体和液体成分。具体功能:转速可达10000 rpm,用于样品预处理。

分析天平:精确称量样品和试剂。具体功能:精度0.0001 g,用于制备反应混合物。

计时器:记录酶反应时间。具体功能:精度0.1秒,用于控制反应 duration。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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