牛黄上清胶囊的成分及含量检测

检测样品的基本信息

本品为硬胶囊，内容物为棕黄色至深棕色的粉末；气香，味苦。

检测范围

牛黄上清胶囊、胶囊剂、纳入各省、自治区、直辖市价格主管部门定价范围的非处方药剂型目录、国家发展改革委定价药品目录、牛黄散、牛黄丸、牛黄膏、上清丸、上清散、胶体果胶铋胶囊、牛黄上清胶囊、胶囊剂、纳入各省、自治区、直辖市价格主管部门定价范围的非处方药剂型目录、国家发展改革委定价药品目录、牛黄散、牛黄丸、牛黄膏、上清丸、上清散、胶体果胶铋胶囊、肌苷胶囊、复方牛黄消炎胶囊（牛黄消炎灵胶囊）、胶囊内镜检查、国家基本药物目录（2012年版）、国家基本药物目录、国家基本药物目录（2018年版）、枸橼酸铋钾胶囊、降脂灵胶囊、布洛芬胶囊、心脑舒通胶囊、脑心通胶囊、鸡骨草胶囊、复方田七胃痛胶囊、龙胆泻肝胶囊、慢肝养阴胶囊、富马酸亚铁胶囊、牛黄抱龙丸、丹参舒心胶囊、复方胆通胶囊、复方海蛇胶囊、牛黄上清胶囊等。

参考检测方法

黄芩、栀子照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05%磷酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为240nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。 ------------------------------------------------------------------ 时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%） ------------------------------------------------------------------ 0～1810→2390→77 18～3023→2777→73 30～3527→3573→65 35～403565 40～4535→5065→50 45～5050→1050→90 ------------------------------------------------------------------ 对照品溶液的制备取黄芩苷对照品和栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含黄芩苷40μg、栀子苷20μg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，混匀，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液10～20μl与供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。 本品含黄芩以黄芩苷（C₂₁H₁₈O₁₁）计，不得少于1.5mg；含栀子以栀子苷（C₁₇H₂₄O₁₀）计，不得少于0.60mg。 大黄照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液（90：10）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备取大黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约0.3g，精密称定，加2.5mol/L硫酸溶液20ml，加热回流2小时，放冷，加三氯甲烷30ml，加热回流1小时，分取三氯甲烷液，酸液继续用三氯甲烷加热回流3次，每次20ml，每次1小时，合并三氯甲烷液，用水洗涤2次，每次40ml，取三氯甲烷液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每粒含大黄以大黄素（C₁₅H₁₀O₅）计，不得少于0.22mg。 冰片照气相色谱法（通则0521）测定 色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇20000（PEG-20M）为固定相，凃布浓度为10%；柱温为140℃。理论板数按龙脑峰计算应不低于4000。 校正因子测定取水杨酸甲酯适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶液。另取龙脑对照品20mg，置10ml量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。 测定法取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率25kHz）15分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。 本品每粒含冰片以龙脑（C₁₀H₁₈O）计，不得少于6.2mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品，置显微镜下观察：草酸钙簇晶大，直径60～140μm（大黄）。 （2）取本品内容物1.2g，加三氯甲烷20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人工牛黄对照药材20mg，加甲醇5ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为对照药材溶液。再取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液10μ1、对照药材溶液及对照品溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20：25：2：3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （3）取本品内容物1.2g，加甲醇50ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液5ml（剩余滤液备用），溶剂回收至干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，置水浴上加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，溶剂回收至干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各2～10μ1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显5个相同的橙色突光斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。 （4）取〔鉴别〕（3）项下的剩余滤液，浓缩至20ml，通过中性氧化铝柱（100～200目，3g，内径为1.0cm），收集流出液，浓缩至5ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，取滤液作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺（3：3.5：1：1.5：0.5：1）为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，预饱和20分钟，展开，取出，晾干，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。 （5）取本品内容物1.2g，加三氯甲烷20ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液1ml，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯（17:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点。 （6）取黄芩苷对照品、栀子苷对照品、连翘酯苷A对照品、芍药苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含黄芩苷40μg、栀子苷20μg、连翘酯苷A10μg、芍药苷10μg的溶液，作为对照品溶液。照〔含量测定〕项下的色谱条件试验，分别吸取〔含量测定〕项下的供试品溶液和上述对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪。供试品色谱图中，应呈现与对照品色谱峰保留时间相对应的色谱峰。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检研究院的服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。