安宫牛黄丸的成分及含量检测-检测标准-检测项目-北检院

检测样品的基本信息

本品为黄橙色至红褐色的大蜜丸，或为包金衣的大蜜丸，除去金衣后显黄橙色至红褐色；气芳香浓郁，味微苦。

检测范围

安宫牛黄丸、开窍剂、新型冠状病毒肺炎·内闭外脱证、牛黄承气汤、开窍法、三陷、突起睛高·火毒内陷证、中医内科急症、内风、风、安宫牛黄丸、开窍剂、新型冠状病毒肺炎·内闭外脱证、牛黄承气汤、开窍法、三陷、突起睛高·火毒内陷证、中医内科急症、内风、风、新型冠状病毒感染·内闭外脱证、睛胀、突起睛高、急黄、目珠子突出、睛高突起、黄耳伤寒·热陷心包证、发背、内陷、开闭、开窍通神、三陷变局、小儿昏迷、小儿闭证、安脑牛黄片、小儿热厥、疫喉谵语、疫喉便溏、中毒性痢疾、痰话、安宫牛黄丸等。

参考检测方法

胆红素照高效液相色谱法（通则0512）测定（避光操作）。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1%醋酸溶液（95：5）为流动相；检测波长为450nm。理论板数按胆红素峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取胆红素对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1ml含15μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取重量差异项下本品，剪碎，取约4g，精密称定，精密加入硅藻土适量（约为取样量的2倍）充分混匀后研细，取粉末适量（相当于本品30mg），精密称定，置具塞锥形瓶中，加入10%草酸溶液（含0.15%十六烷基三甲基氯化铵）10ml，密塞，涡旋混匀，精密加入水饱和的二氯甲烷50ml，密塞，称定重量，混匀，超声处理（功率500W，频率53kHz，水温25～35℃）40分钟，放冷，再称定重量，用水饱和的二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，离心（转速为每分钟4000转），分取二氯甲烷液，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每丸含牛黄以胆红素（C₃₃H₃₆N₄O₆）计，〔规格（1）〕，不得少于9.3mg；〔规格（2）〕不得少于18.5mg。黄芩黃连照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为278nm。理论板数按黄芩苷计算应不低于6000。 . 对照品溶液的制备取黄芩苷对照品和盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含黄芩苷20μg、盐酸小檗碱10μg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备取本品10丸，剪碎，取约0.45g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml，密塞，称定重量，超声处理（功率350W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每丸含黄芩以黄芩苷（C₂₁H₁₈O₁₁）计，〔规格（1）〕不得少于5.0mg，〔规格（2）〕不得少于10.0mg；含黄连以盐酸小檗碱（C₂₀H₁₇NO₄·HCl）计，〔规格（1）〕不得少于2.3mg，规格（2）〕不得少于4.5mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品，置显微镜下观察：不规则碎片灰白色或灰黄色，稍具光泽，表面有灰棕色色素颗粒，并有不规则纵长裂缝（水牛角浓缩粉）。不规则碎块无色或淡绿色，半透明，有光泽，有时可见细密波状纹理（珍珠）。不规则细小颗粒暗棕红色，有光泽，边缘暗黑色（朱砂）。不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽（雄黄）。纤维束鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显，石细胞鲜黄色（黄连）。韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细（黄芩）。果皮含晶石细胞类圆形或多角形，直径17～31μm，壁厚，胞腔内含草酸钙方晶（栀子）。糊化淀粉粒团块几乎无色（郁金）。（2）取本品2g，剪碎，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-三氯甲烷-冰醋酸（2：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（3）取盐酸小檗碱对照品、黄芩苷对照品，分别加乙醇制成每1ml含盐酸小檗碱0.2mg的溶液和每1ml含黄芩苷O.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取〔鉴别〕（2）项下的供试品溶液20μl及上述两种对照品溶液各10μl，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G薄层板上使成条状，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10：7：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，分别在日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与黄芩苷对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的条斑；在与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，紫外光下显相同的黄色荧光条斑。（4）取本品1.5g，剪碎，加乙酸乙酯5ml，超声处理15分钟，放冷，离心，取上清液作为供试品溶液。另取冰片对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（5）取本品3g，剪碎，照挥发油测定法（通则2204）试验，加环己烷0.5ml，缓缓加热至沸，并保持微沸约2.5小时，放置30分钟后，取环己烷液作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加环己烷制成每1ml含2.5mg的溶液，作为对照品溶。照气相色谱法（通则0521）试验，以苯基（50%）甲基硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为9%，柱长为2m，柱温为210℃。分别吸取对照品溶液和供试品溶液适量，注入气相色谱仪。供试品色谱中应呈现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。