二十七味定坤丸的成分及含量检测

检测样品的基本信息

本品为黑色的小蜜丸或大蜜丸；味苦、微甜。

检测范围

二十七味定坤丸、二十七味定坤丸（定坤丸）、二十四气推拿法、二十四把还阳手、二十七气、二十八脉、五十七痏、二十三蒸、二十八会、阴阳二十五人、二十七味定坤丸、二十七味定坤丸（定坤丸）、二十四气推拿法、二十四把还阳手、二十七气、二十八脉、五十七痏、二十三蒸、二十八会、阴阳二十五人、定坤丸、七味地黄丸、二十五变、水俞五十七处、七味羌活膏、七味红花殊胜丸、十七椎、心蒸、二十五周、二十五人、七味广枣丸、一周、切脉、气蒸、二十四脉、风湿二十五味丸、医心方、七味散、十七味药酒、七味定痛散、二十七味定坤丸等。

参考检测方法

照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于4000。 时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%） 0～331981 33～3519→4081→60 35～424060 42～4540→1960→81 601981 对照品溶液的制备取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品剪碎，取适量，精密称定，精密加入半量的硅藻土，研碎，过三号筛，取约12g，精密称定，置索氏提取器中，加入二氯甲烷适量，加热回流提取3小时，弃去二氯甲烷提取液残渣挥干，置索氏提取器中，加入甲醇70ml，加热回流提取至提取液无色，提取液蒸干，残渣趁热加水40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次（20ml，20ml，15ml，15ml，10ml），合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，合并氨洗液，用水饱和的正丁醇提取2次，每次10ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渲用甲醇溶解并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品含西洋参以人参皂苷Re（C₄₈H₈₂O₁₈）计，小蜜丸每1g不得少于0.30mg；大蜜丸每丸不得少于3.6mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm（茯苓）。种皮石细胞呈淡黄色或淡黄棕色，表面观呈多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含深棕色物（醋五味子）。纤维成束，深棕色或红棕色，壁甚厚（醋香附）。 （2）取本品36g，剪碎，加硅藻土30g，研匀，加乙醚60ml，超声处理30分钟，滤过，药渣备用；滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材、川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。 （3）取〔鉴别〕（2）项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取佛手对照药材0.5g，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （4）取〔鉴别〕（2）项下的备用药渣，加乙醇60ml，趄声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残液加水30ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醉饱和的水洗涤3次，每次15ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇1ml溶解，加在中性氧化铝柱（100～200目，3g，内径为1～1.5cm）上，用甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （5）取本品36g，剪碎，加硅藻土20g，研匀，加乙醚80ml，超声处理30分钟，滤过，药渣挥尽乙醚，加水饱和的正丁醇100ml，超声处理60分钟，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次20ml，再用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次15ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502），吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （6）取〔鉴别〕（5）项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、拟人参皂苷F₁₁对照品，分别加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述五种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （7）取本品12g，剪碎，加硅藻土6g，研匀，加70%乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用浓氨试液调节pH值至11，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮（9：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中熏3分钟后取出，挥尽薄层板上吸附的碘，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检研究院的服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。