补肾益脑丸的成分及含量检测-检测标准-检测项目-北检院

检测样品的基本信息

本品为棕褐色的浓缩水丸；味甘、微酸。

检测范围

补肾益脑丸、补肾抗老、龙脑丸、补肾益脑片、益脑散、补肾益脑胶囊、补肾丸、补肾养血丸、补肾固齿丸、安神益脑丸、补肾益脑丸、补肾抗老、龙脑丸、补肾益脑片、益脑散、补肾益脑胶囊、补肾丸、补肾养血丸、补肾固齿丸、安神益脑丸、益脑胶囊、补肾汤、补肾健脾益气方、牛黄醒脑丸、补肾强身胶囊、茸桂补肾口服液、参精补肾胶囊、茸参补肾胶囊、补肾安神口服液、银红补肾药酒、复方羊胎盘补肾口服液、复方益智补肾口服液、参味补肾合剂、八子补肾胶囊、藿蓉补肾颗粒、十味龟鹿补肾合剂、复方苁蓉补肾合剂、藿参补肾酒、仙戟补肾胶囊、仙灵地黄补肾颗粒、补肾益脑丸等。

参考检测方法

盐补骨脂照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（45：55）为流动相；检测波长为245nm。理论板数按补骨脂素峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含10μg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备取本品适量，研细，取lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率200W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每lg含盐补骨脂以补骨脂素（C₁₁H₆O₃）和异补骨脂素（C₁₁H₆O₃）的总量计，不得少于0.45mg。五味子照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（60：40）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取〔含量测定〕盐补骨脂项下的供试品溶液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得。本品每lg含五味子以五味子醇甲（C₂₄H₃₂O₇）计，不得少于0.25mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品，置显微镜下观察：薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物（熟地黄）。种皮石细胞表面观不规则，多角形，壁稍厚，壁波状弯曲，层纹清晰（枸杞子）。种皮栅状细胞淡棕色或红棕色，表面观类多角形，壁稍厚，胞腔含红棕色物（盐补骨脂）。种皮石细胞呈多角形、类圆形或不规则形，壁稍厚，纹孔及孔沟明显（五味子）。内种皮细胞棕黄色，表面观长方形或类方形，垂周壁连珠状增厚（炒酸枣仁）。不规则颗粒暗棕红色，略有光泽（朱砂）。不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4-6μm（茯苓）。淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24-40μm，脐点短缝状或人字状（麸炒山药）。（2）取本品4g，研碎，加甲醇30ml加热回流1小时，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，水溶液备用，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，加水40ml，煎煮15分钟，脱脂棉滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各2-4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（14：7：2）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（3）取〔鉴别〕（2）项下的备用水溶液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20mL合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次50ml，取正丁醇液，回收溶剂至干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取红参对照药材1g，加水0.5ml搅拌湿润，加水饱和的正丁醇10ml，超声处理30分钟，离心，取上清液，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rg₁对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。（4）取本品4g，研碎，加乙酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂对照药材、川芎对照药材各lg，分别加乙酸乙酯10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液。再取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品，加乙酸乙酯制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，在紫外光（365nm）下检视，供试品色谱中，在与补骨脂对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（5）取五味子对照药材lg，加三氯甲烷20ml，加热回流20分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液。再取五味子醇甲对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取〔鉴别〕（2）项下的供试品溶液及上述对照药材溶液、对照品溶液各2-5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。