明目地黄丸的成分及含量检测-检测标准-检测项目-北检院

检测样品的基本信息

本品为黑褐色至黑色的水蜜丸、黑色的小蜜丸或大蜜丸；气微香，味先甜而后苦、涩。

检测范围

明目地黄丸、青盲·肝肾两虚证、乌风障症、破血明目汤、羚羊散血饮、青盲、高风内障、高风雀目、高风障症、青光眼、明目地黄丸、青盲·肝肾两虚证、乌风障症、破血明目汤、羚羊散血饮、青盲、高风内障、高风雀目、高风障症、青光眼、非处方中药、云雾移睛、蝇翅黑花、雀盲、鸡盲、雀目昏睛、雀目内障、鸡蒙眼、雀目、鸡摸眼、黄昏不见、阴风障、地黄丸、阳衰不能抗阴之病、白内障、绿风、绿风变花、绿水灌瞳、绿水灌珠、绿风内障证、明目地黄丸等。

参考检测方法

酒萸肉照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液（1：6：3：90）为流动相；检测波长为236nm；柱温为40℃。理论板数按马钱苷峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备取马钱苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含20ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品水蜜丸，研碎，取1.3g，精密称定；或取小蜜丸或重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率为250W，频率为33kz）15分钟使溶散，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，加在中性氧化铝柱（100～200目，4g，内径为1cm）上，用40%甲醇50ml洗脱，收集流出液及洗脱液，蒸干，残渣用50%甲醇适量使溶解，转移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含酒萸肉以马钱苷（C₁₇H₂₆O₁₀）计，水蜜丸每1g不得少于0.30mg；小蜜丸每1g不得少于0.22mg；大蜜丸每丸不得少于2.0mg。牡丹皮照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70：30）为流动相；检测波长为274mn。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于3500。对照品溶液的制备取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含15ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品水蜜丸，研碎，取0.5g，精密称定；或取小蜜丸或重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取0.5g，精密称定。置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10ul与供试品溶液20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含牡丹皮以丹皮酚（C₉H₁₀O₃）计，水蜜丸每1g不得少于0.50mg；小蜜丸每1g不得少于0.40mg；大蜜丸每丸不得少于3.6mg。芍药苷照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液（14：86）为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于4500。对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50ug的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取牡丹皮含量测定项下的供试品溶液25ml，蒸干，残渣加水25ml，微热使溶解，放冷，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次25ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含白芍和牡丹皮以芍药苷（C₂₃H₂₈O₁₁）计，水蜜丸每1g不得少于0.80mg；小蜜丸每1g不得少于0.60mg；大蜜丸每丸不得少于5.4mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品，置显微镜下观察：淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24～40um，脐点短缝状或人字状（山药）。不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6um（茯苓）。薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物（熟地黄）。果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁连珠状增厚（酒萸肉）。薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟（泽泻）。种皮石细胞表面观不规则多角形，壁厚，波状弯曲，层纹清晰（枸杞子）。花粉粒类圆形，直径24～34um，外壁有刺，长3～5um，具3个萌发孔（菊花），纤维直径15～35um，壁厚，微木化，有大的圆形纹孔（白芍）。果皮纤维木化，上下层纵横交错排列（蒺藜）。不规则团块暗灰色，不透明，加酸后产生气泡（锻石决明）。（2）取本品水蜜丸18g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸24g，剪碎。加乙醚10ml使湿润，加石油醚（30～60℃）40ml，超声处理15分钟，静置过夜，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液6ul、对照品溶液4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热5分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（3）取本品水蜜丸6g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸9g，剪碎，加硅藻土5g，研匀，烘干。加正己烷30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取当归对照药材1g，加正己烷20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（4）取本品水蜜丸6g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸9g，剪碎，加硅藻土4g，研匀。加乙醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。