骨痛灵酊的成分及含量检测-检测标准-检测项目-北检院

检测样品的基本信息

本品为橙红色的液体，久置有混浊或轻微沉淀；气香。

检测范围

骨痛灵酊、骨痛热症、纳入各省、自治区、直辖市价格主管部门定价范围的非处方药剂型目录、眉棱骨痛、眼眶骨痛、背脊骨痛、尾骶骨痛、骨痛、眉棱骨痛·肝血虚证、眉棱骨痛·风痰上扰证、骨痛灵酊、骨痛热症、纳入各省、自治区、直辖市价格主管部门定价范围的非处方药剂型目录、眉棱骨痛、眼眶骨痛、背脊骨痛、尾骶骨痛、骨痛、眉棱骨痛·肝血虚证、眉棱骨痛·风痰上扰证、眉棱骨痛·肝火上炎证、眉棱骨痛·风热上扰证、骨痛丸、骨痛药酒、祛风湿骨痛酒、风湿骨痛胶囊、跌打扭伤灵酊、烧伤灵酊、附桂骨痛颗粒、外搽白灵酊、氯屈膦酸二钠注射液、氯屈膦酸二钠片、水蓼根、回阳玉龙膏、氯屈膦酸二钠胶囊、风湿痛药酒、骨髓浸润性贫血、骨髓病性贫血、员在、夜光、骨痛灵酊等。

参考检测方法

雪上一枝蒿照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-磷酸盐缓冲溶液（取磷酸氢二钠1.97g，磷酸二氢钾0.22g，加水溶解并稀释至1000ml，用80%磷酸溶液调节pH值至7.3）（72：28）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按雪上一枝蒿甲素峰计算应不低于1500。对照品溶液的制备取雪上一枝蒿甲素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含100μg的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品25ml，置蒸发皿中，水浴蒸至约10ml，用稀盐酸调节pH值至2～3，转移至分液漏斗中，用适量0.1mol/L盐酸洗涤容器，洗液并入分液漏斗中（必要时用少量三氯甲烷溶解），使酸液总量约25ml，用三氯甲烷轻摇洗涤2次（10ml，5ml），合并三氯甲烷液，用0.1mol/L盐酸洗涤2次（5ml，3ml），合并上述酸水溶液，加氯化钠2g，轻摇使溶解，用氨试液调节pH值至9～10，用三氯甲烷振摇提取5次（25ml，15ml，10ml，10ml，10ml），合并三氯甲烷液，加入适量无水硫酸钠脱水，滤过，收集滤液，残渣用三氯甲烷洗涤2次，每次5ml，合并滤液，于60℃水浴上挥至近干，加无水乙醇1ml，自然挥干，加甲醇溶解并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理（功率250W，频率33kHz）5分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，静置，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含雪上一枝蒿以雪上一枝蒿甲素（C₂₂H₃₃N0₂）计，应为60～170μg。冰片照气相色谱法（通则0521）测定。色谱条件与系统适用性试验改性聚乙二醇20000（PEG～20M）毛细管柱（柱长为30m，内径为0.53mm，膜厚度为1μm）；柱温为150℃。理论板数按龙脑峰计算应不低于2000。校正因子测定取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为内标溶液。另取龙脑对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液。精密量取对照品溶液5ml及内标溶液2ml，置25ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法精密量取本品溶液5ml，加在中性氧化铝柱（100～200目，6g，柱内径为1.5cm，用无水乙醇10ml预洗）上，以无水乙醇洗脱，用25ml量瓶收集洗脱液约22ml，精密加入内标溶液2ml，加无水乙醇至刻度，摇匀，静置，吸取上清液1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含冰片以龙脑（C₁₀H₁₈0）计，不得少于0.65mg。

部分参考标准

《中国药典》2022年版

GB/T 41277-2022中药材(植物药)新品种评价技术规范

GB 6265-1986 中药材压缩打包运输包装件

GB/T 31773-2015 中药方剂编码规则及编码

样品鉴别方法

（1）取本品40ml，水浴上挥去乙醇，加水使总量约至20ml，用稀盐酸调节pH值至2～3，转移至分液漏斗中，加三氯甲烷振摇提取2次（15ml，10ml），弃去三氯甲烷液，水液加氨试液调节pH值至9～10，用三氯甲烷振摇提取2次（15ml，10ml），合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取雪上一枝蒿对照药材1g，加氨试液1ml润湿后，加三氯甲烷20ml振摇30分钟，放置过夜，滤过，取三氯甲烷液，药渣再加三氯甲烷10ml振摇提取5分钟，滤过，合并三氯甲烷液，用0.1mol/L盐酸溶液15ml振摇提取，提取液用氨试液调节pH值至9～10，用三氯甲烷15ml振摇提取，取三氯甲烷提取液置水浴上挥干，残渣加无水乙醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液6～10μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-二乙胺（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（2）取本品20ml，置水浴上蒸干，残渣用乙醚10ml分3次溶解，倾取乙醚液，浓缩至0.5ml，作为供试品溶液。另取龙血竭对照药材10mg，加乙醚10ml，振摇提取10分钟，滤过，滤液浓缩至0.5ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸（3：2：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。