NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法

标准中涉及的相关检测项目

《NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法》是关于检测饲料中莫能菌素含量的一项标准。在这份标准中，主要包括以下几个方面：

该标准主要针对饲料中的莫能菌素进行检测，这是一个特定的抗生素，因此检测项目集中于测定饲料样本中莫能菌素的浓度。

标准采用高效液相色谱法（HPLC）作为检测手段。该方法的基本步骤包括样品的制备、色谱条件的设置、样品的分离检测以及数据的分析。

• 样品前处理：涉及样品的提取、净化等步骤，以确保样本适合进行液相色谱分析。
• 高效液相色谱参数：包括流动相的选择、色谱柱的规格和使用条件、检测波长、流速等参数的设定。

该标准适用于各种饲料产品，特别是含有莫能菌素的饲料添加剂和混合饲料。它在饲料生产和质量控制中具有重要用途，确保动物饲料的安全性和有效性。

NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法的基本信息

标准名：饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法

标准号：NY/T 725-2003

标准类别：农业行业标准(NY)

发布日期：2003-12-01

实施日期：2004-03-01

标准状态：现行

NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法的简介

本标准规定了检测动物饲料中莫能茵素含量的高效液相色谱(HPLC)方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莫能菌素含量的测定。本方法检测限为5mg/kg。NY/T725-2003饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法NY/T725-2003

NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法的部分内容

NY/T725—2003

本标准是在参阅了美国全国饲料协会（NFIA）推荐的通用分析方法及国内外大量文献的基础上，根据我国技术发展水平研究制定的，采用了高效液相色谱（HPLC)-柱后衍生化法。本标推由中华人民共和国农业部和全国饲料工业标准化技术委员会提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：国家兽药评价中心（中国农业大学动物医学院）。本标准主要起草人：呙于明、沈建忠、张素霞、袁建敏。1范围

饲料中莫能菌素的测定

高效液相色谱法

本标准规定了检测动物饲料中莫能菌素含量的高效液相色谱(HPLC)方法。NY/T 725--2003

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莫能菌素含量的测定。本方法检测限为5mg/kg

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有修改单（不包括勘误内容）或修改版均不适合本标准，然雨，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样方法

3方法原理

用甲醇-水提取试样中的莫能菌素，以甲醇-冰乙酸-水作为流动相、香草醛为衍生剂，用高效液相色谱-柱后衍生化-紫外检测法分离测定。4试剂和溶液

除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合GB/T6682二级用水的规定。4.1试样提取液：［甲醇（色谱纯）十水」（90+10）。4.2香草醛衍生液：量取5ml.浓硫酸，缓慢加人到250mL甲醇中，置冰水浴中，缓缓加人20g香草醛，混匀，脱气后避光保存，临用现配。4.3莫能菌素标准液：

4.3.1莫能菌素标准贮备液：准确称取莫能菌素标准品（纯度≥90%)0.1000g，置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解，定容，其浓度为1000μg/mL的储备液，置4℃冰箱中保存。4.3.2莫能菌素标准工作液：分别准确吸取一定量的标准贮备液（4.4.1），置于10mL容量瓶中，用甲醇稀释、定容，配制成浓度为2.0μg/ml，4.0μg/ml,6.0μg/ml.,8.0μg/mL,10.0μg/ml.12.0μg/ml.的标准工作液。

5仪器和设备

实验室常用仪器、设备。

5.1高效液相色谱仪：配柱后衍生化装置和紫外检测器。5.2 离心机。

5.3振荡器。

5.4玻璃具塞三角瓶（250mL）。5.5微量进样器。

5.6微孔滤膜（0.45μm）。

NY/T 725—2003

6试样制备

按GB/T14699.1规定，取有代表性的样品，四分法缩减取约200g，经粉碎，全部过1mm孔筛，混勾装人磨口瓶中备用。

7测定步骤

7.1试样提取

称取一定量的试样（10.0g配合饲料，或5.0g浓缩饲料，或1.0g添加剂预混合饲料），置于250mL玻璃具塞三角瓶中，加入40mL试样提取液（4.1），往复震荡30min。静止10min，过滤。再向试样中分别加入30ml.试样提取液（4.1)，重复提取两次。合并三次提取液，用试样提取液定容到100mL。取1.mL用0.45um微孔有机滤膜过滤作为试样溶液，供高效液相色谱分析。7.2HPLC 色谱条件

色谱柱：Cs柱，长150mm，内径4.6mm，粒径5μm，或相当者。a）

柱温：室温。

流动相：甲醇：冰乙酸：水（94：3：3）。流动相流速：0.7mL/min。

衍生液流速：0.7mL/min。

反应管：不锈钢长10m，内径0.2mm。反应温度：95℃。

检测波长：520nm。

进样体积：20uL。

7.3HPLC 测定

取适量试样溶液（7.1)和相应浓度的标准工作液（4.3.2），作单点或多点校准，以色谱峰面积积分值定量。

8结果计算与表述

8.1试样中莫能菌素的含量按式(1)计算：X=mi×n

式中：

X—试样中莫能菌素的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；ml--HPI.C试样色谱峰对应的莫能菌素的质量，单位为微克（μg)；m—--试样质量，单位为克(g)；n

稀释倍数。

8.2测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后一位。允许误差

两个平行测定的相对偏差不大于10%。2

（1）

北检院检验检测中心能够参考《NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法》中的检验检测项目，对规范内及相关产品的技术要求及各项指标进行分析测试。并出具检测报告。

检测范围包含《NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法》中适用范围中的所有样品。

测试项目

按照标准中给出的实验方法及实验方案、对需要检测的项目进行检验测试，检测项目包含《NY/T 725-2003 饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法》中规定的所有项目，以及出厂检验、型式检验等。

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检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检研究院的服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。