GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程-检测标准-检测项目-北检院

标准中涉及的相关检测项目

在标准《GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程》中，涉及到的检测项目和方法以及涉及的产品可能包括以下内容：

检测项目：

霜霉病菌的检测：主要检测烟草种子中是否存在霜霉病菌孢子。
病原体的分离和鉴定：分离霜霉病菌并进行具体鉴定，以确认病原体种类。
种子健康检测：检测种子的健康状况，确保其无病害。

检测方法：

显微镜检法：利用显微镜对烟草种子表面的病害菌孢子进行观察和分析。
培养基法：将种子在特定培养基上进行培养，以观察霜霉病菌的生长特性和感染程度。
实时PCR检测法：使用分子生物学技术检测霜霉病病原体的DNA，以提高检测的精确度和效率。

涉及的产品：

烟草种子：标准主要针对用于播种的烟草种子进行检疫。
烟草苗床：可能涉及到育苗过程中对病害的监测。
相关的农作物产品：包括可能与烟草种子一同种植或储存的农产品。

该标准的制定主要目的是为了防止烟草霜霉病的传播，保障烟草种子的质量和农业生产的安全。

GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程的基本信息

标准名：烟草种子霜霉病检疫规程

标准号：GB 15699-1995

标准类别：国家标准(GB)

发布日期：1995-08-02

实施日期：1996-03-01

标准状态：现行

GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程的简介

本标准规定了烟草种子检疫对象、程序和方法。本标准适用于各种入境烟草种子的检疫。GB15699-1995烟草种子霜霉病检疫规程GB15699-1995

GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程的部分内容

中华人民共和国国家标准

烟草种子霜粪病检疫规程

Rules for tabacco seed (hlue mold) quarantine1主题内客与适用范围

本标准规定了烟草种子检疫对象、程序和方法。本标准适用于各种入境烟草种子的检瘦。2术语

2.1检疫;为预防危险性烟草病虫害传播蔓延采取的一种措施。2.2烟草猪毒病tobacco blue maldGB 15699--1995

Peromospora tabacina Adam 和 Peronospora nicotianae Speg,异名 Peronospora hyosymi f. sptubacina，又称蓝毒病,是烟草上一种殿灭性病害。现已蔓延至断洲美洲,澳洲,目前我国尚无该病发生，固此做为对外检疫对象。

3检疫捏序

3.1取样

对-批种子总件数按比例抽查取样。在取样时，按对角线五点，棋盘式或分层取样，每点取样10~20（对旅客携带和国际邮包邮寄的少量烟草种子，取样多少视具体情况而定）。取样娶尽量做到有代表性，将取的各点样品均匀抽取平均样品。3.2孢子囊和孢子梗捡疫

3. 2. 1检验方法

洗检骏法。

3.2.2原理

利用振荡的方法,使粘附在种子上的分生抱子和分生孢子梗分散到水中。3.2.3仅器设备

离心机、显微镜、载玻片、振药器、三角瓶。3.2.4试剂

蒸馏水。

3.2.5步骤

取烟种5g-放入三角瓶中，加--定量蒸馏水浸泡0.5h后，再加蒸馏水剧烈振荡5min(也可放在振荡器上搬荡）。将洗液注入离心管，以1 000 r/min的速度离心5 min,去大部分,上清液,每个离心管再加入少量蒸增水，使沉淀重新感浮，取悬浮液制片，用400500倍显微镜捡查，每个戴玻片查10个视（见图1），每个样品检查5～10个载玻锌，检查有无树枝状孢子囊梗和对生的孢子囊，抱子毫大约（13~18) μm×16 μm×29 μms

国案技术监督局1995-08-28批难1996-03-01实施

GB 156991995

图110个视断在载玻片上的分布

烟草霜毒病菌的分生孢子梗和分生孢子切片·见图2。图2烟草霜需病菌的分生孢子梗和分生孢子切片3.3卵孢子检验

3.3.1检验方法

乳酚油透明法。

3.3.2原理

乳酚油加苯胺蓝是真菌标准的浮载剂。苯胺蓝是碱性染料，可染其菌的原生质，而不染细胞壁，因此可以分辨清楚很难看清的真菌疱子。3.3.3假器设备

显微镜、烧杯、电炉、水浴锅。3.3.4试剂

苯胺蓝、苯酚、甘油、乳酚油、蒸馏水。3. 3. 5步骤

GB 156991995

取混合样品烟草种子5g，置于烧杯中用乳酚油煮沸15~30min，煮至烟草种子透明，但尚不至于消解为止。加苯胺蓝（棉蓝）染色后用乳酚油作浮载剂，然后镜检。每个样品查20个玻片（乳酚油的配方苯酚结晶（水浴加热溶化）20mL，乳酸20mL，甘油40mL，蒸馏水20mL）。3.3.6检验结果的统计

统计孢子数量时，用血球计数器，观察80个小格，用其平均数×4000000，就是每毫升悬浮液孢子的数量。

3.4种子检验

3.4.1检验方法

荫芽检验。

3.4.2仪器设备及试剂

灭菌锅、温箱、培养血、滤纸、次氰酸钠、无菌水。3.4.3步骤

取混合样品种子100粒，重复4次。取直径10cn的无菌柏氏培养血或塑料培养血4个，每个培养血放入三层吸足无菌水的吸水纸，将100粒种子均勾排列在吸足水的纸上，盖上培养血，保持湿度。然后放入15~～20℃温箱内培养,经4～7 d观察幼苗上是否有烟草猎霉病菌没染的迹象。若检查种子内部是否有病菌时,则将种子授入1%饮氯酸钠溶10 min,然后置于无菌滤纸上,培养检查。3.4.4检查结果的统计

单发病牵和平均发病率按式(1)、(2)计算：单证发病率（%）

发病种子数

供试发病种子总和

平均发病率（%）二1

3.5分离培养检验

3.5.1检验方法

琮脂培养检验。

3.5.2步骤

用适于植物水培的营养盐类 2. 5 g,琼脂14 g,蒸馏水 1 000 mL。用 300 mL 的大口三角瓶,每瓶整培养基 B0 tmL，用棉塞塞好，消毒后将培养基做成斜面。培养基凝固后，用表面消毒过的种子，在培养基斜面上每瓶加0.01g叠于15~20℃下，种子发芽后，观案幼苗是否有烟草霜霉病菌侵染的迹象。3. 5.3结果统计

统计感染霜获病的百分比,统计方法同3.4.4。3.6隔离试种

3.6.1报检

引种人境之前，引种人应持引种审批单，出口国的检疫证书，贸易合同，向入境的口痒植检机关报检（包括非正规巢道来的种子）。3. 6. 2供检材料登记

供检材料由引种人（单位）送到隔离检疫圃，交检疫收件人登记。3.6.3初检

由检疫人员在初检室对送检材料进行初步检查。3. 6. 4 检疫圃试种

初检合格，可以进入检疫菌的供检材料，在检按温室用消毒过的土和盆进行育苗盆栽。431

3.6.5隔离试种结果评定

GB 156991995

在温室内对供检材料在生长期进行检查，对检查和检测情况进行详细登记，根据检测情况作出评定。

4检疫检验后的评定及处理

4.1人境的烟草种子经检疫未发现被检对象则认为合格。4.1.1发放检疫放行通知单C附录A(补充件))经检疫后认为合格的签发检疫放行通知单，或在货运单上加盖检疫放行章。经严格包装，由专人送中国烟草总公司青州烟草研究所隔离试种检疫。4.1.2国内试种

经隔离试种后未检出被检对象的，交送检人（单位）在国内试种。4.2检疫不合格

经检疫发现有检疫对象者认为不合格。4.2.1签发检疫处理通知单(附录B(补充件))检疫不合格，发现被检对象应作以下处理并签发检疫处理通知单。4.2.2销毁

被检烟种若发现有检疫对象，而且在抽检烟种中1%的比例内有检疫对象，则应在检疫地原地销殿。

4.2.3退同原地

被检烟种中存检疫对象，有以下情况可退回原地，材料较有研究应用价值，抽查烟种检疫对象不超过1%。

4.2.4处理后隔离试种

对少量引进有价值材料可用热处理，处理后在检疫温室试种。干热处理方法：干热消毒，事先将种子进行60℃，2～3h的通风，使种子充分干燥种子薄摊成2cm以内厚度，用干热消毒器70于热处理2以上。处理后的种子在检疫温室用无菌土、盆试种，检验有无检疫对素。将繁殖后的种子（应是无菌的）交送检人（单位），可在国内试种。5发放检短证书

入境烟草种子没有发现检疫对象时，签发植物检疫证书（附录C（补充件))：经检疫不符合贸易合同规定时，签发检验证书[附录刀补充件)，说明情况作为对外索赔证件，并制备保存该被检烟种和检疫对象的标本，作为素赔的依据，6检疫报告

包括受检日期、货批号、数量及重量。检疫结果：

处理意见：

检疫员：

检疫单位：

报检单位

品名及数量

提单/运单号

运输工具名称及号码

CB 15699--1995

检疫放行通知单

(补充件）

中华人民共和国动植物检疮

放行通知单

出口国家/地区

上述货构经检疫合格

中华人民共和国XX动植物检疫所编号：

标记唛码

报检单位

品名及数量

提单/运单号

运输工具名称及号码

GB156991995

附录B

捡疫处理通知单

(补充件）

中华人民共和国动植物检察

处理通知单

出口国家/地区

检疫情况及处理要求：

中华人民共和国文X动植物检疫所434

编号：

标记唛码

发实人及地址

GB 15699 - 1995

附录C

植物检疫证书

（补充件）

中华人民共和国农业部

植物检疫证书

PHYTOSANITARY CERTIFICATE

MINISTRY OF AGRICULTURE OF P. R. CHINAName & Address of Cnnsignor

全货人及地址

Namc &. Address of Consignee品名及数量

Name of Prudluce & Qunntity Declared产地

Place uf Chrigin

发货口库

Port uf Desparch

到货日期

Date of Arrival

运前工具

Meats f Canyeyance

却华日期

Date of Completion of Discharg编号No

标记噬码 Mark & Number

蓝证明本批货物经态所子

年月日检度，发现有下列病、夜，杂单好This is to ccrtify thet the consignment described above was examined on by this service and the following disexsesandfor insect ests andfor weed seeds were Fourd:这批货物不杆合买卖亚方基订的第号贸易合同/合约的规定

The consignment does not comply with the requiretneats stipulated in thesignor and the consighee.

contract No.agrged between the con基证日期 Date of Issue

格疫宫 Name of Authorized Officer签名Signature

中华人民共和国动植物检疫杭关及其官可或表不承担频发本证书的任何群些责任。Na finencial lizbility shull attch to thc enimel and plant querantine service of P. R. Chine ar to any officer or representa-tive of the service with tespect to this certificate.435

中华人民共和国

XX动植物检疫所

GB 15699—1995

附录D

检验证书

（补充件）

(.ANIMAL AND PLANT QUARAN-

TINE SERVICE THE PEOPLE'S REPUBLIC OF CHINA)

地址：

(ADDRESS:

电报挂号：

(CABLE:

发货人

(Consignor)

受货人

(Consignee)

(Commodity)

报检重量及(或)数量

(Weight &/or Quantity Declared)发货港或站

(Port or Station of Despatch)装运韶名或车号

(Means of Conveyance)

标记及号码：

检验证书

(INSPECTION

CERTIFICATE)

(Mark & Number)

到货日期

(Date of Arrival)

卸货日期

(Date of Campletion of Discharge)年月月捡验，发现有下列病、虫、杂草籽；本批货物经本所于

(This lot of commodity was examinedon by this service and the following diseases and/orinsect pests and/or weed seeds were found:)这批货物不附合买卖双方签定的第号贸易合同的规定。

(This lot of commodity doesn't comply with the requirements stipulated in the contractNo.

agreed between the consignor and the consignee)检验员

(Director)

注意：本证书详文中如有何异点,凝以中文为主，(inspector)

(N. B. In case oi difference,the Chinese text shall be regarded as authentic, )436

附加说明：

本标推由国家烟草专卖局提出。CB156991995

本标准由全国烟草标准化技术委员会归口：本标准由中国烟草总公司青州烟草研究所负责起草，本标准主要起草人终道儒、石金开，转子恩、艾树理、刘洪祥。437

现行

北检院检验检测中心能够参考《GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程》中的检验检测项目，对规范内及相关产品的技术要求及各项指标进行分析测试。并出具检测报告。

检测范围包含《GB 15699-1995 烟草种子霜霉病检疫规程》中适用范围中的所有样品。