轴索型吉兰一巴雷综合征动物模型

模型机制

GBS与空肠弯曲菌(campylobacter jejuni，Cj)表面抗原脂多糖(lipopo-lysaccharide，LPS)有密切关系。利用轴索型GBS患者粪便所培养的Cj株，经纯化分离扩大培养。以酚水法提取出LL-Cj的表面LPS成分，作为抗原接种于大耳白兔皮下，建立轴索型GBS模型。

造模方法

1.动物和菌株制备 选用健康良好的大耳白兔，体重1.76kg±0.11kg，单笼喂养颗粒饲料和水。利用河北医科大学第二医院神经内科轴索型GBS患者粪便中培养出的Cj株(LL-Cj)，经美国疾病控制与预防中心(center of disease control and prevention，CDC)鉴定为PENO：19型Cj株，利用酚水法提取其表面LPS成分(LL-LPS)。将LPS与弗氏完全佐剂(CFA)混合后完全乳化成每0.1mICFA含LPS10pg

2.实验方法 实验组采用在兔背部脊柱旁皮下注射含LPS的CFA每次0.1ml(含LPS10μg)，每周 1次，共3~6次。对照组只注射CFA，每次0.1ml，每周1次，共6次。

3.分别作下列各指标的观察和检查 ①症状与体征：观察兔精神状态、肢瘫、腱反射、饮食、尿便失禁、体重等;2电生理学检查：发病兔于处死前进行腓总神经的运动传导速度、运动诱发波幅F波潜伏期及胫前肌肌电图检查;3病理学检查：取坐骨神经，其部分标本立即固定于4%多聚甲醛中2小时，经锇酸染色1小时，经分离单纤维光镜观察。取2/3长度坐骨神经立即固定于4%多聚甲醛中，4℃固定24小时以上，石蜡包埋，HE、LFB(luxol fast blue)镀银染色，光镜观察。取部分坐骨神经立即固定于2.5%戊二醛中，4℃固定24小时以上，用1%锇酸后固定，系列丙酮脱水，环氧树脂812，815，DDSA、DMP-30包埋，制备超薄切片，H-7500 型透射电镜观察。

模型特点

LPS注后 14天、18天、20天出现轴索型GBS典型症状，发病率为11.54%(3/26)。发病兔具有以下特点：

1.活动减少，四肢瘫，后肢重，精神委靡，饮食差，体重下降等。

2.坐骨神经锇酸染色、分离单纤维显示严重Wallerian样变性。

3.坐骨神经HE、LFB染色无明显炎症细胞浸润，轴索肿胀、扭曲、轴索粗细不均，有间断，部分轴索消失，呈严重的轴索变性。

4.电镜下轴索固缩，体积变小，严重者轴索膜破坏溶解，呈大小不等、形态不规则泡样结构，轴索移向一边。微丝、微管致密或聚集成团，线粒体固缩。髓鞘结构基本正常。部分板层有灶性松解现象、板层分离现象，呈波纹状改变，但程度较轻。

5，电生理学改变显示，腓总神经运动传导速度正常，运动诱发动作电位的波幅明显降低，F波潜伏期正常，有纤颤电位和正尖波。

应用范围

适用于GBS免疫发病机制研究。Cj感染后诱发GBS的分子模拟、自身抗体、交叉抗体机制研究。还应用于GBS的临床流行病学研究、电生理学研究、病理学研究和病原学研究。